بررسی کشت سلول های بنیادی اسپرم ساز در شرایط چسبنده و غیر چسبنده

سلول های بنیادی اسپرم ساز سلول هایی هستند که در غشاء پایه لوله های اسپرم ساز قرار گرفته و قادر به تولید اسپرم در طول حیات مردان می-باشند. مطالعات مختلف آزمایشگاهی نشان داد این سلول ها بعد از جداسازی از بافت بیضه، تحت شرایط های خاص قادر به کشت هستند. در این مطالعه سلول های بیضه موش های نر5-7 روزه نژاد NMRIپس از تیمار با آنزیم های هضم کننده کلاژناز تیپIV، DNAse و دیسپاز، جداسازی شدند. سپس تعداد تقریبی106 سلول در محیط های حاوی فاکتورهای رشد با شرایط کشت چسبنده، روی فیبروبلاست جنینی موش و کشت غیر چسبنده، روی آگارز 1 درصد، کشت داده شدند. نتایج نشان داد سلول های بیضوی کشت شده در شرایط غیرچسبنده قادر به تشکیل کلنی هایی بوده که همانند کلنی های سلول های بنیادی اسپرم ساز تشکیل شده در شرایط کشت چسبنده، مارکرهای سلول های جنسی را بیان می-کنند. مطالعه میکروسکوپ الکترونی کلنی ها نشان داد، هر دو نوع کلنی همانند سلول های اسپرم ساز واقع در غشاء پایه لوله های اسپرم ساز دارای هسته بزرگ اما سیتوپلاسم کوچک می باشند. رنگ آمیزی ایمونوفلورسانس وجود کلنی های β1-Integrin، α6-Integrin و Oct4 مثبت را تایید کرد. آنالیزهای Real-time PCR نیز تفاوت معنی داری در بیان ژن های سلول های جنسی این کلنی ها با سلول سوماتیکی نشان داد. از طرف دیگر افزایش بیان Ki67 در هر دو نوع کلنی با استفاده از بررسی ایمونوسیتوشیمی مشاهده شد که بیانگر خاصیت تکثیرپذیری این قبیل از سلول-ها است. این نتایج نشان می دهد سیستم کشت غیر چسبنده می تواند بعنوان یک روش جدید برای کشت کوتاه مدت سلول های جنسی مشتق شده از بیضه مورد توجه محققین در تحقیقات بعدی قرار گیرد.