شناسایی باسیلوس های مولد پروتئاز قلیایی حاصل از لجن باکتوفیوژ و سپراتور با استفاده از تکنیک های مبتنی بر کشت و مولکولی

کارخانه‏‏های صنایع لبنی ، حجم بالایی لجن از باکتوفیوژ و سپراتور تولید می‏کنند و این درحالی است که تقاضای جهانی برای استفاده از پروتئاز ها رو به افزایش است. اخیرا استفاده و ذخیره مواد ضایعاتی به محصولاتی با ارزش افزوده فرایندی پایدار است بنابراین هدف از این مطالعه بررسی پتانسیل این لجن برای تولید آنزیم‏های پروتئاز قلیایی بود . بار میکروبی کل بر روی محیط کشت Plate Count Agar برای باکتری های هوازی و بی‏هوازی اختیاری در دمای °C‏37 و °C‏50 در هر دو نوع لجن تعیین شد . شمارش لاکتوباسیلوس‏ها در محیط کشت MRS Agar برای لجن باکتوفیوژ و سپراتور به ترتیب برابر با ‏ logCFU/ml‏25‏‏/0±12/3 و ‏log CFU/ml 2/0 ± 085/3 بود. کپک و مخمر سطح جمعیتی برابر با log CFU /ml‏1/0±3/2 و log CFU /ml 1/0 ± 08/2 برای این دو نوع لجن داشت. باکتری‏های پروتئولیتیک از لجن لبنی با استفاده از Skim Milk Agar جداسازی شدند . هاله‏ی روشن در اطراف کلنی نشانگر ارگانیسم تولید کننده‏ی پروتئاز در این محیط کشت است. پارامتر‏های مختلفی (دما ، pH ، شوک حرارتی و نوع لجن) برای تولید حداکثر تولید آنزیم بهینه شدند. بیشترین فعالیت پروتئولیتیک در دمای °C 37 با (05/0 (P < مشاهده شد. جدایه‏های Bacillus‏‏های مولد پروتئاز قلیایی به وسیله‏ی واکنش‏های زنجیره‏ای پلیمراز (PCR) شناسایی شدند . باکتری‏های شناسایی شده شامل Bacillus cereus strain zk2 ، Bacillus sp . cp-h71 ، Bacillus thuringiensis strain ILBB224 و Bacillus sp.Bac6D2 بودند.