طراحی آغازگرهای واکنش زنجیره ای پلیمراز و کارایی آنها به منظور شناسایی جهش های ژن FAH عامل بیماری تیروزینمی نوع یک

تیروزینمی نوع یک بیماری اتوزومی مغلوب به دلیل نقص آنزیم فوماریل استواستات هیدرولاز (FAH) می باشد، تا کنون حدود 40 جهش پاتوژن برای این ژن معرفی شده است. هدف از این تحقیق تعیین و طراحی آغازگرهای واکنش زنجیره ای پلیمراز و کارایی آنها به منظور شناسایی جهش های ژن FAH عامل بیماری تیروزینمی نوع یک بود.

در این مطالعه مورد شاهدی، 12 نفر وارد مطالعه شدند و در دو گروه مساوی؛ اول شش نفر مبتلا به بیماری تیروزینمی نوع یک و گروه دوم شش نفر غیر مبتلا، پس از اخذ رضایت آگاهانه نمونه خون استخراج شد و سپس استخراج DNA  از نمونه های خون انجام گرفت. برای قسمت هایی از ژن که در پژوهش های قبلی جهش گزارش شده بود، آغازگر واکنش زنجیره ای پلیمراز طراحی شد. اختصاصیت آغازگرهای طراحی شده با بانک های اطلاعاتی آنلاین مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس طی واکنش زنجیره ای پلیمراز قطعات ژن تکثیر شد. سپس قطعات تکثیر یافته پس از تخلیص تعیین توالی شدند و در نهایت آنالیز توالی به منظور پیدا کردن جهش عامل بیماری انجام گرفت.

آغازگرهای طراحی شده قطعات ژن FAH را به طور کاملا اختصاصی تکثیر کردند. توالی یابی قطعات تکثیر شده منجر به شناسایی جهش بی معنی +709 C>T در اگزون 10 ژن هر شش مورد بیمار مورد مطالعه گردید. والدین افراد بیمار ناقل این جهش ژنتیکی بودند. در هیچ یک از افراد گروه کنترل جهش ژنتیکی در ژن FAH یافت نشد.

جهش بی معنی  +709 C>Tیک جهش بیماری زا در ژن FAH می باشد که قبلا فقط در ترکیه گزارش شده بود. آغازگرهای طراحی شده به طور مقرون به صرفه و به طور اختصاصی قادر بودند ژن FAH را تکثیر کنند. هم چنین میتوان از این آغازگرها  جهت شناسایی افراد ناقل بیماری و همین طور تشخیص قبل از تولد بیماری تیروزینمی نوع یک استفاده کرد.