استفاده از پرده آمنیون به عنوان داربستی مناسب برای کشت و تمایز کندروژنیک سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی: یک مطالعه تجربی

پرده آمنیون انسانی (HAM) یک داربست مناسب و موثر برای کشت و انتقال سلول می باشد. و سلول های بنیادی مشتق از بافت چربی (ADSCs) در بدن یکی از مهمترین منابع سلول بنیادی برای پیوند هستند.

هدف از مطالعه حاضر ارزیابی قابلیت پرده آمنیون فریز شده به عنوان داربست برای تکثیر و تمایز سلول در شرایط in vitro می باشد.

در این مطالعه تجربی، نمونه های بافت چربی از ناحیه اینگوینال بیماران مرد با رنج سنی 30-15 سال جداسازی شد. به منظور تعیین هویت سلول های بنیادی چربی از فلوسایتومتری برای شناسایی مارکرهای CD31، CD45، CD90 و CD105 استفاده شد. پرده آمنیون از جفت  فرد دهنده بلافاصله پس از سزارین تهیه شد و پس از شستشو، تریپسینه کردن، و آسلولار کردن، از پرده آمنیون به عنوان داربست به 3 روش استفاده گردید: 1) سلول های بنیادی چربی به روش مونولایر و به مدت 14 روز در داخل فلاسک به کندروسیت تمایز یافته، سپس بر روی هر دو سمت پرده انتقال یافتند. 2) سلول های بنیادی بر روی هر دو سطح پرده آمنیون و به مدت 14 روز، کشت و تمایز کندروژنیک پیدا کردند (تمایز بر روی داربست). 3) تمایز کندروژنیک به مدت 14 روز و با تکنیک ریزتوده انجام شد، سپس بر روی پرده منتقل شد. در نهایت نمونه ها بصورت کیفی با ارزیابی هیستولوژیکی بررسی شدند.

فلوسیتومتری حضور سلولهای بنیادی مزانشیمی را تایید کرد. یافته های هیستولوژیکی نشان داد که سلول ها اتصال و رشد بسیار خوبی بر روی سطح استرومایی پرده آمنیون داشته اند. از میان سه روش ذکر شده، تمایز بر روی داربست بهترین نتیجه را داشته است.

سلول های بنیادی بافت چربی اتصال، زیست پذیری و پتانسیل تمایزی مناسب و خوبی بر روی سطح استرومایی پرده آمنیون دارند. علاوه بر این، کشت و تمایز مستقیم ADSC بر روی HAM مناسب تر از کشت سلول های تمایز یافته بر روی HAM است.