افزایش میزان ویتامین E در کلزا (Brassica napus L.) با استفاده از ژن γ-tmt

ویتامین E یکی از ویتامین های محلول در چربی و دارای چندین ایزومر است که شامل توکوفرول ها و توکوترینول هاست. تبدیل گاما توکوفرول به آلفا توکوفرول با فعالیت آنزیم γ-tmtصورت می پذیرد. بسیاری از گیاهان از جمله کلزا ژن γ-tmt را ندارند تا آنها را از گاما توکوفرول به آلفا توکوفرول تبدیل سازند. هدف این مطالعه انتقال ژن γ-tmt به گیاه کلزا بود تا آن را به تولید آلفا توکوفرول و افزایش ویتامین E قادر سازد. ژن γ-tmt از گیاه گوجه فرنگی (Lycopersicum esculentum L.) رقم Memory 1 جدا سازی شد. سپس با استفاده از PCR تکثیر، با آنزیم XbaI برش داده، در حامل pBluscriptII همسان سازی و به E. coli منتقل گردید. در ادامه، این ژن به حامل pBI121 و حامل به آگروباکتریوم تومفشینس انتقال داده شد. دو رقم کلزا، زرفام و هایولا 401 استفاده شدند. کوتلیدون بذرهای کانولا با آگروباکتریوم تومفشینس تلقیح شدند. هشت گیاه با پتانسیل تراریخت بودن از هر رقم (زرفام 1-8 و هایولا 1-8) برای آزمایش های بعدی انتخاب شدند. پس از ظاهر شدن ساقه و ریشه، دانه رست ها برای وجود ژن γ-tmt سنجیده شدند. میزان ویتامین E گیاهان تراریخت به کمک اسپکتروفتومتر FTIR سنجیده شد. نتایج افزایش چند برابری ویتامین E را در گیاهان تراریخته نسبت به گیاهان شاهد نشان داد. افزایش ویتامین E به ترتیب 41/2 و 71/2 برابر در رقم زرفام و هایولا بود. بنابراین، این روش می تواند برای غنی سازی روغن گیاهان روغنی با ویتامین E در نظر گرفته شود.