طراحی DNA واکسن حاوی ژن های کدکننده sicl آنتی ژن های باکتری اشرشیاکلی انتروتوکسیژنیک (ETEC) و اشریشیاکلی انتروهموراژیک (EHEC)

اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک عامل اسهال های باکتریایی که منجر به مرگ و میر سالانه صدها هزار کودک می شود. اشیرشیا کلی O157:H7 ، شایعترین سوش اشریشیاکلی انتروهموراژیک است. تولید یک واکسن ترکیبی موثر برای اشریشیاکلی انتروهموراژیک و اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک بسیار حایز اهمیت است.

در این مطالعه تکثیر و همسانه سازی ژن sicl ، بعنوان یک DNA واکسن صورت گرفت. ترادف ژنهای کد کننده آنتی ژن از بانک ژنی ارزیابی و اپی توپهای آنها به منظور طراحی پرایمر برای ژن کایمری سنتتیک (تهیه شده از گروه امانی) بررسی شد و تکثیر آن از طریق PCR صورت گرفت ،زیر همسانه سازی ژن کایمریک چند قسمتی در وکتور بیانی یوکاریوتیک به منظور ساخت DNA واکسن انجام شد و در آخر پروتئین با روش کروماتوگرافی نیکل تخلیص و با وسترن بلات ارزیابی شد.

نتایج ایمونوبلات بیان پروتئین کایمریک SICL به شکل ذرات نامحلول  12 ساعت پس از القا نمایانگر وجود یک باند 76 کیلو دالتونی است. تخلیص پروتئین نوترکیب با استفاده از ترادف هیستیدینی داخل ژن وتایید پروتئین تخلیص شده با آنتی بادی اختصاصی پروتئین نوترکیب ، صحت بیان پروتئین را نشان داد .

مطالعات بیان و تخلیص پروتئین و ارزیابی آن با وسترن بلات ، نشان دهنده بیان پروتئین در میزبان است.