تهیه آنتی بادی زنجیره سنگین پلی کلونال علیه پروتئین انتقال دهنده روی SLC39A6 و کاربرد آن در تست های تشخیصی

پروتئین SLC39A6 (solute carrier family 39) یا LIV-1 یک پروتئین انتقال دهنده روی می باشد که در سرطان های استروژن مثبت مانند سرطان سینه بیان بیش ازحد دارد. افزایش بیش از حد غلظت روی می تواند محرک تقسیم سلولی نامنظم و سرطان و متاستاز شود. بنابراین مهار پروتئین های انتقالی روی می تواند در درمان سرطان موثر باشد. پروتئین LIV-1 می تواند به عنوان یک نشانگر تشخیصی مناسب سرطان نیز در روش های آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گیرد. مطالعه حاضر جهت تهیه پلی کلونال آنتی بادی شتری برای شناسایی پروتئین LIV-1 در سطح سلول صورت گرفته است.

مطالعه پژوهشی حاضر در انستیتو پاستور ایران، از مهر 1397 تا اسفند 1398 انجام شد. در ابتدا سازه ژنی بیانی حاوی LIV-1 انسانی تهیه و به باکتری E.coli BL21 انتقال داده شد و بیان این پروتئین با IPTG القا شد و سپس به وسیله ستون کروماتوگرافی تمایلی، پروتئین نوترکیب تخلیص گردید. سپس حیوان شتر یا استفاده از این پروتئین ایمن سازی شد. سرم حیوان ایمن شده جدا گردید و عملکرد پلی کلونال آنتی بادی در تست های تشخیصی الایزا وسترن بلات و فلوسیتومتری در شناسایی پروتئین LIV-1 مورد ارزیابی قرار گرفت.

یافته ها:

نتایج نشان دادند که پروتئین LIV-1 به خوبی تخلیص شده است و شتر علیه این پروتئین ایمن شده است. با توجه به نتایج، وسترن بلات، الایزا و فلوسایتومتری نشان داده شد این سرم قابلیت اتصال و شناسایی پروتئین LIV-1 را دارا می باشد.

نتیجه گیری:

در این پژوهش نشان داده شد که آنتی بادی پلی کلونال شتری قابلیت استفاده در روش های آزمایشگاهی را دارد و می تواند برای تست های ایمونولوژی و کاربردهای درمانی مورد توجه قرار گیرد.