کلونینگ و بیان ژن آنزیم فیتاز در باکتری اشرشیا اکلی جهت بازیابی آنزیم در شرایط آزمایشگاهی

پروتئین فیتاز آنزیمی است که توانایی تجزیه ی فیتیک اسید به میواینوزیتول و فسفات معدنی را دارا می باشد و از این آنزیم به صورت گسترده ای به عنوان یک افزودنی در غذای حیوانات استفاده می شود. هدف از این مطالعه دستیابی به  تولید میزان بالایی از آنزیم فیتاز باکتریایی در وکتور بیانی PET26b در میزبان باکتریایی بود.

جهت تولید آنزیم فیتاز نوترکیب، ژن هدف به وکتور بیانی pET-26b- وارد شد و وکتور نوترکیب پس از تکثیر در باکتری اشریشیاکلی DH5α به باکتری اشریشیاکلی BL21 به عنوان میزبان بیان منتقل شد. برای جداسازی فیتاز نوترکیب از روش SDS-PAGE استفاده گردید و میزان تولید پروتئین نوترکیب با استفاده از الکتروفورز بررسی شد.

آنزیم فیتاز باکتریایی با موفقیت در باکتری اشریشیاکلی بیان شد و وزن مولکولی فیتاز نوترکیب تولید شده در حدود 85 کیلو دالتون تخمین زده شد. همچنین pH بهینه برای فعالیت آنزیم فیتاز باکتریایی نوترکیب در حدود 5/5 برآورد شد.

نتایج بدست آمده نشان دهنده موفقیت در تولید آنزیم فیتاز در شرایط آزمایشگاهی با استفاده از میزبان BL21 با کمترین هزینه ممکن جهت استفاده در صنعت خوراکی طیور است.