ردیابی و آنالیز تبارزایی چهار ویروئید مهم آلوده کننده تاکستان های استان زنجان

ویروییدها در دو خانواده آوسان ویروییده با سه جنسPelamoviroid) ،  Avsunviroidو (Elaviroid و پوسپی ویروییده با پنج جنس (Pospiviroid, Coleviroid, Cocaviroid, Hostuviroid, Apscaviroid) طبقه بندی می شوند که ویروییدهای شناخته شده انگور متعلق به سه جنس خانواده پوسپی و یروییده هستند. به منظور بررسی وضعیت آلودگی به ویروییدهای انگور از تاکستان های استان زنجان نمونه برداری به صورت انتخابی از گیاهان دارای علایم مشکوک و همچنین فاقد علایم ظاهری مشخص بیماری های ویروییدی انجام و در مجموع 121 نمونه گیاهی دارای علایم یا بدون علایم جمع آوری شد. استخراج آران ای کل از بافت های برگی و آوندی صورت گرفت و سپس، ساخت دی ان ای مکمل (cDNA) با استفاده از آغازگر تصادفی شش تایی انجام شد. آزمون نسخه برداری معکوس-واکنش زنجیره ای پلیمراز (پی سی آر) با استفاده از آغازگر اختصاصی ویروییدهای برای ردیابی ویروییدهای Grapevine yellow speckle viroid 1(GYSVd-1) ،(GYSVd-2)   Grapevine yellow speckle viroid 2،(HSVd)  Hop stunt viroid، Australian grapevine viroid (ASGVd) انجام شد و نتایج حاکی از تکثیر قطعات اختصاصی مربوط به ویروییدهای ذکر شده به ترتیب در 16، 19، 24 و 26 نمونه (حدود 14%، 16%، 20% و 22% نسبت به کل نمونه های آزموده شده) بود. تعیین ترادف نوکلیوتیدی هفت محصول پی سی آر به صورت انتخابی وبررسی روابط تبارزایی بر اساس توالی های نوکلیوتیدی نشان داد که جدایه های جدید ردیابی شده در این تحقیق با جدایه هایی که قبلا از ایران گزارش شده اند در یک گروه تبار زایی قرار می گیرند. علاوه براین، آلودگی مخلوط ویروییدهای مذکور نشان داد بیشترین آلودگی مخلوط مربوط به آلودگی با ویرویید کوتولگی رازک با سایر ویروییدها در اکثر مناطق نمونه برداری شده بود. این مطالعه اولین گزارش از شناسایی ویروییدهای مهم آلوده کننده تاکستان های استان زنجان بر اساس داده های مولکولی می باشد.