ارزیابی دو رویکرد غیرترایخت سازی در راه اندازی تداخل آران ای بر علیه ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی

سویه شدید ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی (Tomato yellow leaf curl viru, TYLCV-IL) یک بگوموویروس تک بخشی مخرب با گسترش جهانی است. دو روش غیرتراریخت سازی، واکسیناسیون آران ای دولا و کاربرد سازه سنجاق سری بیان کننده آران ای دولا، به منظور القای تداخل آران ای بر علیه ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی مورد استفاده قرار گرفت. بررسی پروفایل آران ای های کوچک مداخله گر مشتق شده از ژنوم ویروس، دو نقطه داغ شامل قسمت هایی از توالی ژن های کدکننده پروتیین پوششی و پروتیین همراه با همانندسازی را در راه اندازی خاموشی ژن پس از ترانویسی مشخص نمود. آران ای های دولای مشتق شده از این توالی ها در شرایط درون شیشه ای تولید شدند و همزمان و یا سه روز قبل از مایه زنی همسانه عفونت زای ویروس، بر روی سطح برگ گیاهان توتون مورد استفاده قرار گرفتند. تمام گیاهان علایم مشخص آلودگی را در زمان 21 روز پس از مایه ز نی نشان دادند و قطعات ژنومی ویروس در گیاهان دارای علایم توسط واکنش زنجیره ای پلی مراز تکثیر شد. علی رغم حرکت سیستمیک آران ای های دولای مورد استفاده در گیاهان توتون، واکنش زنجیره ای پلی مراز در زمان حقیقی، هیچ تفاوت آماری معناداری در سطح تجمع ژنوم ویروس در بین تیمارهای مختلف نشان نداد. در رویکرد دوم، کاربرد سازه سنجاق سری بیان کننده آران ای دولا، بروز علایم آلودگی را تا زمان 21 روز پس از مایه زنی سرکوب کرد. همچنین ژنوم ویروس در گیاهان فاقد علایم ردیابی نشد که نشان دهنده قطع همانندسازی ژنوم ویروس است. این نتایج، کارآیی متمایز دو روش القای تداخل آران ای را علیه یک گونه مهم بگوموویروس نشان می دهد. نقش عوامل مختلف تاثیرگذار بر کارآیی تداخل آران ای علیه ویروس پیچیدگی برگ زرد گوجه فرنگی مورد بحث قرار گرفته است.