خالص سازی و محلول سازی همزمان جسم توده ای MO-CBP2 با استفاده از شیب اوره

امروزه بیان هترولوگ پروتیین ها نقشی کلیدی در بیوتکنولوژی و صنعت دارد. تشکیل اجسام توده ای در بیان هترولوگ پروتیین ها، به خصوص بیان پروتیین های یوکاریوتی در میزبان های پروکاریوت که معروف ترین آن ها E. coli است؛ یکی از پردردسر ترین چالش ها برای محققان می باشد. تشکیل جسم توده ای اغلب به دلیل بیان بالا، پیوند های دی سولفیدی، بار و یا کانفورماسیون خاص پروتیین است. اجسام توده ای برخی پروتیین ها دارای فعالیت اند اما بسیاری نیز باید محلول و مجددا سرشته شوند تا فعالیت خود را به دست آورند. روش های سرشته کردن مجدد پروتیین اغلب نه تنها روش های چند مرحله ای و زمان برند بلکه بازده ی کمی نیز دارند. در این مطالعه، برای اولین بار پروتیین MO-CBP2 از گیاه گرمسیری مورینگا اولیفرا به صورت هترولوگ بیان شد اما در باکتری E. coli تشکیل جسم توده ای داد. روش های مختلفی برای جلوگیری از تشکیل جسم توده ای و یا سرشته کردن این پروتیین به کار گرفته شد که یکی از کارآمد ترین آن ها استفاده از کروماتوگرافی تمایلی ستون نیکل سفارز به همراه شیب غلظت اوره 8-0 مولار بود که با بازده ی زیاد، موجب خالص سازی و سرشته شدن مجدد همزمان این پروتیین در مراحل کمتر شد. این روش که در آن می توان پروتیین مورد نظر را تا حدود زیادی خالص و محلول کرد می تواند به عنوان روشی مناسب و کارآمد پیشنهاد شود.