طراحی روش ELISA برای سنجش آنتی بادی های IgG و IgM انسانی علیه SARS-CoV-2

بیماری کووید-19، یک بیماری تنفسی است که به وسیله ی گونه ای از کروناویروس تحت عنوان SARS-CoV-2 ایجاد می شود. این مطالعه با هدف طراحی یک روش الایزای غیرمستقیم برای سنجش آنتی بادی های IgM و IgG علیه SARS-CoV-2، انجام پذیرفت.

در این مطالعه تجربی، توالی پروتیین نوترکیب نوکلیوکپسید SARS-CoV-2 در باکتریE. coli BL21 بیان شد. پروتیین تولیدی با استفاده از SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ تایید شد. در ادامه، از پروتیین نوترکیب نوکلیوکپسید تولید شده، روش ELISA غیرمستقیم برای سنجش آنتی بادی های IgG و IgM علیه SARS-CoV-2 طراحی شد. سپس از این روش برای سنجش آنتی بادی های IgM و IgG در 61 بیمار مبتلا یا بهبود یافته از بیماری COVID-19 به همراه 31 نمونه سرم فرد سالم استفاده شد. در انتها نتایج به دست آمده از روش ELISA طراحی شده بر روی نمونه ها با کیت تجاری مورد تایید وزارت بهداشت مقایسه شد.

پروتیین نوترکیب نوکلیوکپسید بیان و تخلیص شد و سپس به کمک SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ مورد تایید قرار گرفت. میزان جذب نوری به دست آمده از روش ELISA طراحی شده در 61 بیمار و 31 فرد سالم در مقایسه با کیت تجاری هم راستا بوده است. حساسیت و ویژگی روش ELISA طراحی شده برای سنجش IgG 100 درصد تعیین شد، این در حالی است که حساسیت 96/72 و ویژگی 96/77 برای سنجش IgM گزارش شد.

تست های سرولوژیک به تنهایی ابزاری مناسب برای تشخیص نیستند، با این حال همراهی با تست های مولکولی موجب افزایش صحت و حساسیت در تشخیص بیماری می شود. هم چنین این آزمایشات برای بررسی های اپیدمیولوژیکی بسیار ارزشمند می باشند.