ارزیابی بیان موقت ژن های AS1 و 4'CGT در گلبرگ های بنفشه آفریقایی با سیستم اگرواینفیلتریشن جهت تولید رنگ جدید در گل

تولید ارقام زینتی با رنگ های جدید هدف اصلی در صنعت گل و گیاهان زینتی است. بنفشه آفریقایی از لحاظ تجاری به خوبی شناخته شده و در رنگ های مختلفی به جز گل زرد موجود است. این پژوهش با هدف تغییر رنگ گلبرگ های بنفشه آفریقایی و تولید مسیر بیوسنتزی رنگدانه آیورون از طریق دست ورزی ژنتیکی ژنهای AS1 و 4'CGT انجام شد. بدین منظور ، این ژن ها با استفاده از PCR با آغازگرهای اختصاصی از گلبرگ گل میمون زرد جداسازی و بترتیب در ناقل بیانی pCAMBIA1304 وpBI121 اتصال گردید. پلاسمیدهای نوترکیب 4'CGT +pBI121 وAS1 pCAMBIA1304+ با استفاده از بررسی های Colony PCR، هضم آنزیم، توالی یابی و هم ردیف سازی آن ها در بانک اطلاعاتی، مورد تایید قرار گرفت. سپس به روش الکتروپوریشن به آگروباکتریوم سویه LBA4404 منتقل و با استفاده از سیستم بیان موقت در گلبرگ های گیاه بنفشه آفریقایی مورد بررسی قرار گرفت. در این سیستم سوسپانسیون آگروباکتریوم حامل سازه ژنی با استفاده از سرنگ در پایه گلبرگ ها تزریق شد. نتایج مورفولوژیکی پس از 3 روز به وضوح تغییر رنگ گلبرگ های سفید به زرد کم رنگ را نشان داد و هیچ تغییری در گلبرگ های شاهد مشاهده نشد. آنالیزPCR و مشاهده با میکروسکوپ نوری بترتیب بیان ژن وتغییرات فنوتیپی را تایید کردند. همچنین آیوروسیدین-6-او- گلوکزید (AOG) با استفاده از HPLC-DAD-MSn در گلبرگ های تراریخت شناسایی شد. با بکارگیری این سیستم می توان سازه ژنی را با اعتماد بیشتری برای تراریختگی دایم به گیاهان زینتی انتقال داد. همچنین این پژوهش می تواند راهی را برای مهندسی ایجاد رنگ زرد در گونه های گیاهان زینتی که فاقد این نوع رنگ هستند باز نماید.