تثبیت کووالانسی آنزیم پراکسیداز نوترکیب لپیدیوم درابا (LDP) بر روی ساختار آلی-فلزی روی با استفاده از گلوتارآلدئید

پراکسیداز لپیدیوم درابا (LDP) آنزیمی از کلاس III پراکسیداز های گیاهی می باشد که توالی اسیدآمینه ای آن با پراکسیداز ترب کوهی (HRP) بیش از 90 درصد تشابه دارد.

در این پژوهش، به منظور اتصال محکم LDP به چارچوب آلی-فلزی روی (Zn-MOF)، بعد از بیان و تخلیص آنزیم، شرایط تثبیت با استفاده از لینکر گلوتارآلدیید بهینه سازی شد و سپس ویژگی های فیزیکوشیمیایی، سینتیکی و پایداری آن با آنزیم آزاد مقایسه شدند.

بهترین شرایط تثبیت با بازده 67%، در غلظت های؛ Zn-MOF 02/0 گرم، آنزیم mg/ml 75/0 و گلوتارآلدیید 2/1 دسی مولار به مدت سه ساعت انکوبه شدن بدست آمد. نتایج نشان داد که فعالیت ویژه آنزیم تثبیت شده بیش از دو برابر آنزیم آزاد افزایش یافته است و Km آن به سوبسترای TMB نسبت به آنزیم آزاد، 49 درصد کاهش یافته است. همچنین پایداری سینتیکی آنزیم تثبیت شده در برابر pH و دما نسبت به آنزیم آزاد کاهش یافت