بهبود کیفیت اسپرم خروس طی نگهداری در دمای 4 درجه با افزودن کوئرستین به شکل نانو لیپوزوم و NLC در محیط رقیق کننده

نرخ باروری پایین اسپرم منجمد طیور در مقایسه با دیگر گونه ها، یک چالش جدی برای تلقیح مصنوعی در گله های تجاری است. این چالش ممکن است با برخی ویژگی های فیزیولوژیکی اسپرم طیور مرتبط باشد. از طرف دیگر، تنش های اسمزی، شیمیایی و مکانیکی طی فرآیندهای سردسازی مهم ترین دلایلی هستند که باعث بوجود آمدن تغییرات فراساختاری، بیوشیمیایی و عملکردی در اسپرم می شوند که نتیجه آن مجموعه ای از پدیده های آبشاری است که منجر به کاهش باروری اسپرم خواهد شد. کویرستین یک ترکیب زیست فعال با منشا گیاهی است که با داشتن ساختمان شیمیایی پلی فنلی دارای ویژگی آنتی اکسیدانی است. این ترکیب بعنوان یک فلاونویید مهم و یک آنتی اکسیدان قوی باعث حذف رادیکال های آزاد و کاهش تنش اکسیداتیو در اسپرماتوگونی جوجه ها شد. هدف از این مطالعه، استفاده از کویرستین به شکل نانو در رقیق کننده اسپرم خروس طی نگهداری در دمای 4 درجه می باشد.

بلافاصله پس از جمع آوری منی از خروس ها بررسی های اولیه صورت گرفت. منی جمع آوری شده از هر 15 خروس به منظور حذف اثرات فردی با یکدیگر مخلوط و به محیط رقیق‏ کننده اضافه شدند.. غلظت های مختلف کویرستین (10، 15 و 20 میکرومولار) در سه شکل (غیرمحافظت شده و در داخل ساختارهای لیپوزومی و NLC) به ترکیب رقیق کننده پایه اضافه شد. سپس سرد شدن تدریجی نمونه‏ های منی رقیق شده در دمای C 4 به مدت 3 ساعت انجام گردید. سپس در زمان های صفر (بلافاصله پس از رسیدن نمونه ها به دمای 4 درجه سانتی گراد)، 24 و 48  پارامتر های جنبایی، یکپارچگی غشایی، پراکسیداسیون لیپیدی، درصد اسپرم های غیر طبیعی و درصد زنده مانی نمونه ‏ها مورد ارزیابی قرار گرفت.

نتایج بیانگر آن است که تیمارهای آزمایشی تاثیر معنی داری بر پارامترهای مورد ارزیابی در زمان صفر نداشته اند. در زمان 24 ساعت نگهداری در دمای 4 درجه، 15 میکرومولار کویرستین لودشده در NLC باعث بهبود معنی دار پارامترهای جنبایی کل، پیش رونده، زنده مانی و یکپارچگی غشای اسپرم در مقایسه با گروه کنترل شد. در زمان 48 ساعت نگهداری در دمای 4 درجه تیمار 15 میکرومولارکویرستین لودشده در NLC باعث بهبود معنی دار پارامترهای جنبایی کل، پیش رونده، زنده مانی و یکپارچگی غشای اسپرم در مقایسه با گروه کنترل می شود. همچنین، نتایج بیانگر آن است که تیمارهای آزمایشی تاثیر معنی داری روی درصد ناهنجاری اسپرم خروس طی نگهداری در دمای 4 درجه در سه زمان 0، 24 و 48 ساعت در مقایسه با گروه کنترل نداشته است. در زمان های 24 و 48 ساعت نگهداری در دمای 4 درجه تیمار 15 میکرومولار کویرستین لودشده در NLC باعث کاهش معنی دار میزان MDA اسپرم در مقایسه با گروه کنترل شد.

نتایج این آزمایش نشان دهنده آن است که تیمار 15 میکرومولار کویرستین لودشده در NLC باعث بهبود بسیاری از پارامترهای مورد ارزیابی می شود و بنابراین برای استفاده در رقیق کننده اسپرم خروس توصیه می گردد.