اثر ملاتونین بر قطر کلونی ها، سطح آپوپتوزیس و بیان ژن های وابسته به آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند

هدف از اجرای این تحقیق بررسی اثر ملاتونین بر قطر کلونی ها، سطح آپوپتوزیس و بیان ژن های مرتبط با آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند بوده است. سلول های بنیادی اسپرماتوگونی موجود در غشاء پایه لوله های منی ساز از بیضه گوسفند نژاد افشاری با استفاده از مراحل هضم آنزیمی جداسازی شدند. نمونه ها به چهار گروه تقسیم شدند. گروه شاهد شامل محیط پایه بود و در سه گروه بعدی به ترتیب تیمارهای H2O2 (30 میکرومولار)، ملاتونین (1 نانو مول) و ملاتونین+H2O2 (30 میکرومولار H2O2 به همراه 1 نانو مول ملاتونین) به محیط پایه اضافه شدند. سلول ها به مدت سه هفته کشت داده شدند و قطر کلونی ها در روزهای پنج و 14 و 21 پس از شروع کشت ارزیابی شدند. پس از پایان دوره کشت میزان آپوپتوزیس و بیان ژن های مرتبط با آپوپتوزیس (BAX و BCL2) نیز ارزیابی شد. در روز 5 و 14 کشت، قطر کلونی های اسپرماتوگونی در گروه های شاهد و ملاتونین نسبت به دو گروه دیگر بیشتر بود (05/0≥P). در روز 21 کشت، بیشترین و کمترین قطر کلونی های اسپرماتوگونی به ترتیب در گروه های ملاتونین و H2O2 مشاهده شد (05/0≥P). کمترین و بیشترین درصد سلول های آپوپتوتیک و همچنین بیان ژن BAX و مقدار نسبت BAX/BCL2 به ترتیب در گروه های ملاتونین و H2O2 یافت شد (05/0≥P). همچنین بیشترین مقدار بیان ژن BCL2 در سلول های اسپرماتوگونی گروه ملاتونین دیده شد (05/0≥P). در نتیجه استفاده از ملاتونین در محیط کشت می تواند روشی مفید در برای بهبود کیفیت و کاهش بروز آپوپتوزیس در سلول های بنیادی اسپرماتوگونی گوسفند باشد.