بررسی تاثیر باکتری لاکتوباسیلوس برویس بر میزان بیان ژن های Rel A ،IKB و Casp3 در سلول های سرطانی کولون

مطالعات نشان داده اند که باکتری های پروبیوتیک شروع و پیشرفت عوامل سرطان زا را ازطریق مسیرهای مختلف مهار می کنند. هدف ما بررسی تاثیر باکتری لاکتوباسیلوس برویس جداسازی شده بر بیان ژن های مرتبط با رشد Rel A, IKB و Casp3 در سلول های سرطانی کولون HT29 می باشد

مواد و روش ها :

در طول این مطالعه ابتدا باکتری های پروبیوتیک لاکتوباسیل گونه برویس کشت داده شدند و پس از تهیه کاندیشن مدیا بر روی سلول های سرطان HT29 تیمار شدند. اثر سمیت سلولی باکتری با استفاده از روش MTT assay (Microculture Tetrazolium Test) مورد بررسی قرار گرفت. با استخراج DNA از سلول های تیمارشده انجام شد و تست DNA Ladder assay صورت گرفت همچنین تست DAPI برای نشان دادن آپوپتوز سلولی انجام شد. پس از استخراج RNA و تهیه cDNA برای تعیین مکانیسم تاثیر این باکتری بر سیگنالینگ سلولی، بیان ژن های مرتبط با رشدRel A, IKB) ،Cas3) به روش Real-time PCR موردسنجش قرار گرفت.

یافته ها :

نتایج حاصل از آزمایش MTT  نشان داد که باکتریه ای لاکتوباسیلوس برویس تکثیر سلوله ای HT29 را مهار کرده و سبب القای آپوپتوز در این سلول ها می شوند و تکثیر ژن Rel A را ازطریق افزایش بیان ژن IKB در این سلول ها مهار می کنند. نتایج دپی و DNA ladder assay حاصل از تیمار سلول های HT29 با باکتری های ذکرشده، تغییرات کیفی آپوپتوز سلولی را نشان داد. علاوه بر این، نتایج Real-time PCR نشان داد که باکتریهای لاکتوباسیلوس برویس سبب افزایش بیان ژن casp3 در سلول های سرطانی کولون HT29 شد (0/038=P).

نتیجه گیری :

یافته های ما نشان می دهد که لاکتوباسیلوس برویس مسیر سیگنالینگ سلولی آپوپتوز در سلول های سرطانی کولون HT29 را تحریک کرده و می توان درجهت استراتژی جدید درمانی و یا اجوانت تراپی برای تیمار سرطان کولون استفاده کرد.