تشخیص و شناسایی کریپتوسپوریدیوم در فاضلاب های خام شهری ورودی به مناطق ساحلی بوشهر با استفاده از nested-PCR

تک یاخته کریپتوسپوریدیوم از انگل های بیماری زای روده ای در آب و هوای گرم و مکان هایی که تصفیه آب و فاضلاب کمتر موثر است، شیوع بیشتری دارند. هدف از این مطالعه تشخیص و شناسایی کریپتوسپوریدیوم در فاضلاب شهری خام ورودی به منطقه ساحلی در شهر بوشهر بود.

در مجموع در دو فصل زمستان و تابستان 48 نمونه فاضلاب خام شهری از 8 ایستگاه برداشت شد. نمونه های فاضلاب از طریق الک 300 میکرومتری برای حذف ذرات بزرگ و سپس بر روی غشای استات سلولز، با اندازه منافذ 2/1 میکرومتر فیلتر شدند. فیلترها خراشیده و با استفاده از 40 میلی لیتر سالین بافر فسفات (PBS) حاوی 05/0 درصد TWEEN شسته شدند و سپس با دور 5000 به مدت 10 دقیقه در دمای 4 درجه سانتی گراد سانتریفیوژ شد. از چرخه ی انجماد و ذوب برای استخراج DNA استفاده شد. سطح DNA استخراج شده با نانو دراپ (اسپکتروفتومتر، ND1000) اندازه گیری شد و محصولات PCR با الکتروفورز در ژل آگارز 2 درصد جدا شدند.

نتایج آنالیز PCR نشان داد که از 48 نمونه، 17 نمونه (4/35 درصد) در مورد کریپتوسپوریدیوم با استفاده از nested-PCR مثبت شدند. در مجموع به ترتیب 11 و 6 نمونه در فصل زمستان و تابستان مثبت بودند.

مقامات محلی بایستی با توجه و بکارگیری فرآیندهای تصفیه فاضلاب از اپیدمی های احتمالی کریپتوسپوریدیوز بین ساکنین و همچنین به کاهش انتقال کریپتوسپوریدیوز انسانی و حیوانی کمک کنند.