تایپینگ سالمونلاهای تیفوئیدی با روش تخلیص پروتئینهای محلول در آب و بکارگیری تکنیک SDS-PAGE

سالمونلاها از مهمترین باکتری های خانواده انتروباکتریاسه هستند که موجب عفونتهای سیستمیک در انسان و حیوانات میشوند. هدف از این مطالعه جداسازی و تایپینگ سالمونلاهای تیفوییدی با روش پلی اکریل آمید ژل الکتروفروزیس SDS-PAGE و مقایسه آن با روش سروتایپینگ میباشد.
در این مطالعه توصیفی - مقطعی تعداد یکصد مورد سالمونلا که از آزمایشگاه های مراکز درمانی شهر همدان جمع آوری شده بود به همراه 4 سویه رفرانس سالمولا و 5 سویه رفرانس دیگر از خانواده انتر و باکتریاسه مورد آزمایش قرار گرفتند. سروتایپینگ نمونه ها با آنتی سرمهای منووالان بیومریو و دیفکو انجام گرفت و الکتروفورز پروتئینهای ساختمانی آنها نیز در ژل 10% پلی آکریل آماید انجام گرفت. پس از رنگ آمیزی ژل ها با آبی کوماسی، اوزان مولکولی باندهای حاصل از الکتروفورز سویه های مورد مطالعه با استفاده از منحنی مربوط به باندهای حاصل از پروتئین های استاندارد مشخص گردید و توسط دستگاه دنسیتومتر مورد آنالیز قرار گرفتند.
از یکصد مورد سالمونلای جدا شده از بیماری 43 مورد (43%) مربوط به سالمونلاتیفی، 20 مورد (20%) سالمونلاتیفی موریوم، 12 مورد (12%) سالمونلاپاراتیفی B 10 مورد (10%) سالمونلاپاراتیفی C و یک مورد سالمونلاپاراتیفی A و بقیه نیز غیر تیفوییدی بودند. در روش الکتروفورز باندهای پروتئینی زیادی از مولکولهای بزرگ بیش از 220 کیلو دالتون (Kda) تا مولکولهای کوچک کمتر از 18.5 کیلو دالتون بدست آمد که به خوبی باعث تمایز سویه ها از یکدیگر گردید و براین اساس سالمونلا تیفی به 5 زیر گروه و سالمونلا پاراتیفی B و C هر کدام به 3 زیر گروه تقسیم شدند. همچنین الگوی پروتئینی سویه های رفرانس سالمونلا اختلاف عمده ای با الگوی پروتئینی سویه های رفرانس انتروباکتریاسه از خود نشان دادند. با این حال یک باند پروتئینی مشترک در ناحیه 43 کیلو دالتون در مقایسه با الگوی پروتئینی سویه های رفرانس انتروباکتریاسه مشاهده گردید.
نتیجه نهایی: نتایج این مطالعه نشان داد که تخلیص پروتئینهای محلول در آب سالمونلاها به بکارگیری تکنیک SDS-PAGE میتواند بعنوان یک روش مطمئن تر از روش سروتاپینگ در طبقه بندی و تایپینگ این ارگانیسمها مورد استفاده قرار گیرد. با این حال تحقیقات بیشتری مورد نیاز است تا این روش بتواند جایگزین روش های سروتایپینگ گردد.