سلولهای CD34 مثبت تکثیر یافته با روش Single Cell Cloning

جداسازی و تکثیر سلول های CD34+ از کشت اولیه سلول های تک هسته ای خون محیطی موش FVB با روش Cloning و ارزیابی آنها با سنجش های مربوط به سلول های پروژنیتور آندوتلیالی سلول های تک هسته ای از خون محیطی موش جدا شده و در پلیت های شش خانه ای فالکون کشت شدند. 14 روز بعد از آغاز کشت، جمعیت سلولی چسبنده از لحاظ برخی مارکرهای سطحی آنالیز شده و با استفاده از دستگاه فلوسایتومتری، سلول های CD34+ جدا شدند و به صورت یک سلول در خانه، در پلیت های 96 خانه کشت شد. چندین کلون تهیه و از لحاظ مارکرهای سطحی و سنجش Dil-ac-LDL و تشکیل لوله عروقی مورد آزمایش قرار گرفت.
جمعیت سلول های چسبنده در کشت اولیه از لحاظ مورفولوژی و برخی مارکرهای سطحی، هتروژن بود. حدود 5 درصد سلول ها CD34+ بود. با استفاده از دستگاه فلوسایتومتری و مطلوب سازی شرایط کشت، چندین کلون از سلول های CD34+ تهیه شد. این کلون ها Dil-ac-LDL+ بوده و در زمان کشت بر روی ماتریژل، لوله عروقی تشکیل دادند.
کشت اولیه سلول های تک هسته ای خون محیطی موش FVB حاوی تعداد کمی سلول با مارکر رده عروقی است که این سلول ها (با مارکر CD34+) قابل کلون کردن هستند.