بررسی تاثیر مایع رویی کشت سلولهای دسیدوآ بر القای آنزیم ایندول آمین 2 و 3 دی اکسیژناز (IDO) در سلول های دندریتیک طی واکنش MLR آلوژنیک

بررسی اثر مایع رویی کشت سلول های دسیدوا بر سلول های دندریتیک از نظر القای پاسخ تکثیری آلوژنیک در سلول های T و نیز از نظر بیان آنزیم ایندول آمین 2 و 3 دی اکسیژناز در ابتدا دسیدوای موش های C57BL/6 حامله آلوژنیک (C57BL/6xBalb/c) در اواسط حاملگی جدا و پس از هضم آنزیمی آن سوسپانسیون سلولی تهیه و کشت داده شد. بعد از 48 ساعت مایع رویی کشت سلول ها جمع آوری و در 70- درجه منجمد شد. سلول های دندریتیک از طحال موش های C57BL/6 با روش هضم آنزیمی و استفاده از محیط گرادیان نایکودنز غنی سازی شدند. سلول های چسبنده ای که بعد از کشت دو ساعته سوسپانسیون سلولی به دست آمد در حضور غلظت های مختلف مایع رویی کشت سلول های دسیدوا به مدت 12 تا 15 ساعت انکوبه شدند. طی این زمان سلول های دندریتیک بالغ شده کف پلیت جدا شدند. لنفوسیت های T از گره های لنفاوی براکیال و اگزیلاری موش های Balb/c با روش نایلون ول جدا شدند. سلول های دندریتیک تیمار شده با مایع رویی کشت سلول های دسیدوا بعد از اشعه دادن (3000 (rad با لنفوسیت های T آلوژن در محیط MLR مجاور شدند و میزان تکثیر سلولی با استفاده از روش جذب تایمیدین رادیواکتیو اندازه گیری شد. برای ردیابی اثر آنزیم IDO ازL - متیل تریپتوفان که مهارکننده کاملا اختصاصی آنزیم است، استفاده شد.
درآنالیز فلوسیتومتری، خلوص سلول های دندریتیک 2±93 درصد و میزان خلوص سلول های T به میزان 2±91 درصد بود. نتایج MLR حاکی از کاهش پاسخ تکثیری سلول های T مجاور شده با سلول های دندریتیک تیمار شده با مایع رویی کشت سلول های دسیدوای موش حامله بود، درحالی که تیمار سلول های دندریتیک با مایع رویی کشت سلول های رحم غیرحامله چنین تاثیری را نشان نداد و این سرکوب شدن با اضافه شدن L - متیل تریپتوفان تعدیل می شد.
مایع رویی کشت سلول های دسیدوا احتمالا از طریق القای بروزIDO در سلول های دندریتیک موجب سرکوب پاسخ لنفوسیت های T می شود.