استخراج و جداسازی LPS غشاء خارجی H.pylori با استفاده از SDS-PAGE و رنگ آمیزی نیترات نقره

Helicobacter pylori (H.pylori) باکتری گرم منفی، مارپیچی شکل، میکروآئروفیلیک، تولید کننده اوره آز و متحرک بوده که به pH اسیدی مقاوم می باشد. از مشخصات این باکتری لیپوپلی ساکاریدهای یا Lipopolysaccharids (LPS) منحصر به فرد آن است. LPS این باکتری مسوول مقاومت زیاد آن در پایداری به اسید معده و فرار آن از سیستم ایمنی بدن می باشد، که آن را هدفی مهم برای اهداف مطالعاتی یا تشخیصی قرار داده است. برای انجام این قبیل مطالعات نیاز به استخراج و جداسازی LPS از غشا خارجی می باشد.
LPS از غشا خارجی یا پوشش H.pylori حاصل از کشت نمونه معده بیماران مبتلا به گاستریت، زخم معده و سرطان معده استخراج گردید. استخراج LPS در این تحقیق با استفاده از دو روش Proteinase K و Hot-Phenol انجام شده و الگوی الکتروفورتیکی آن بوسیله SDS-PAGE و با رنگ آمیزی نقره بدست آمده و بالاخره با الگوی الکتروفورتیکی LPS نمونه E.coli سوش Olll:B4 و سالمونلاسوش ATCL 14028 مقایسه گردید.
الکتروفورز LPS استخراج شده یک الگوی نردبانی را نشان داد. باندهای بدست آمده در سه دسته با وزن مولکولی بالا، متوسط و پایین قرار گرفتند.
یکی از عوامل مهم در بیماری زایی این باکتری LPS آن است. به دلیل تعداد متفاوت زنجیره های اولیگوساکاریدی، الگوی الکتروفورزی به دست آمده بصورت نردبانی است. باندهای با وزن مولکولی بالا S-LPS و باندهای با وزن مولکولی پایین R-LPS)بدون زخیره جانبی(را نشان می دهد.