اندازه گیری غلظت مرفین 6 گلوکورونید با استفاده از روش بهبود یافته ELISA

مرفین داروی ضد درد قوی اپیوئیدی است که در کبد به دو متابولیت مرفین -3- گلوکورونید و مرفین 6- گلوکورونید (M6G) متابولیزه می شود. مرفین 6- گلوکورونید یک ترکیب با فعالیت ضد دردی بالاتری نسبت به مرفین است که می تواند به عنوان جایگزین مرفین در درمان دردهای شدید استفاده شود.

اندازه گیری غلظت سرمی مرفین 6- گلوکورونید به دلیل چربی دوستی بالای مولکول و غلظت سرمی کم آن بعد از تجویز دوزهای نرمال وریدی مرفین، توسط روش های اندازه گیری رایج دشوار بوده و نیاز به ابداع یک روش جدید برای اندازه گیری آن ضروری به نظر می رسید.

در مطالعه حاضر یک روش ELISA رقابتی برای اندازه گیری غلظت مرفین 6- گلوکورونید در سرم و سایر محلول ها ارایه گردید. در این روش یک آنتی بادی (M6G-ovalbumin) با پیوند ضعیف کووالانسی به سطح پلاستیکی چاهک های میکروتیتر متصل شده و میزان رقابت مرفین 6- گلوکورونید و یک آنتی بادی اختصاصی (R29) برای اتصال به (M6G-ovalbumin) اندازه گیری می شود.

این روش یک روش ساده، تکرارپذیر، حساس و اختصاصی برای اندازه گیری سطح سرمی مرفین 6- گلوکورونید بوده و غلظت آن در مقدار بسیار کم سرمی (20 ml) قابل اندازه گیری می باشد. از دیگر مزایای روش ارایه شده اندازه گیری همزمان چندین نمونه (10 تا 35 نمونه) در یک پلیت می باشد.