کلونینگ، بررسی توالی و بیان کموکین SDF-1 در سلول های کبدی موش صحرایی

مقادیر بالایی از پروتئین کموکین SDF-1a (پروتئین مشتق شده از سلول های استرومایی) در بافت های غیر آماسی اپی تلیوم کبد گزارش شده است. ازطرفی ظهور وتولید SDF-1a نیز به وسیله سلول های صفحات مجرایی (Ductal Plates) که نوعی سلول پیش ساز برای اپی تلیوم کبد است، گزارش گردیده است. این پروتئین در لانه گزینی سلول های لنفوسیتB در بافت کبد، موثر و لازم است. بنابراین می تواند در سیستم ایمنی و مصونیت کبد نقش ایفا کند. با توجه به ظهور و تولید این پروتئین در سایر سلول های کبدی، مراجع علمی و مقالات کمی، بروز این ژن را در سلول های هپاتوسیت که سلول های اصلی کبدی می باشند، مورد بررسی قرار داده اند. لذا موضوع این تحقیق بررسی ظهور SDF-1a در سطح MRNA توسط سلول های هپاتوسیت بوده است.
در این پژوهش از روش های تولید مثل غیرجنسی (cloning) استفاده نموده و ظهور این ژن در سلول های هپاتوسیت بررسی شده است. در این راستا در اولین مرحله با خواندن توالی ژن در سلول های هپاتوسیت موش صحرایی و مقایسه صحت اطلاعات خود با داده های پایه (Data Base) ثابت شد که ژن مورد بررسی همان SDF-1a بوده است و در مرحله بعد، میزان ظهور ژن با روش خشک کردن شمالی (Northern Blotting) پردازش شد.
نتایج نشان داد که متعاقب جداسازی هپاتوسیت ها از کبد و کشت اولیه آن ها این ژن در هپاتوسیت ظهور می یابد.
بیان این کموکین احتمالا در پاسخ تنشی سلول های هپاتوسیت به جداسازی و کشت اولیه موثر است.