شناسایی مولکولی فسفولیپاز D به عنوان عامل موثر در رشد و بیماری زایی میکروارگانیسم ها

فسفولیپاز های ترشحی خارج سلولی عموما در هیدرولیز فسفولیپید های خارج سلولی و در نتیجه، تهیه ی منابع تغذیه ای کربن، نیتروژن و فسفات برای سلول دخالت داشته ولی فسفولیپازهای درون سلولی در کنترل اعمال متابولیکی سلول موثر بوده و نقش تنظیمی برای فعالیت بیولوژیکی سلول برعهده دارند. تولید فسفولیپاز ها در میکروارگانیسم های مختلف بیماری زا و مکانیسم اثر آن ها در بیماری زایی این میکروارگانیسم ها اخیرا مورد توجه بسیار گسترده ای قرار گرفته است.
در این پژوهش، DNA ژنومی کپک آسپرژیلوس فومیگاتوس استخراج گردیده و متعاقب تکثیر قطعه ی مورد نظر با تکنیک PCR دژنراتیو از DNA ژنومی میکروارگانیسم، قطعه ی استخراج شده بهpGEMT-Easy vector پیوند زده شده و سپس به سلول میزبان (E.coli Top 10 F'') جهت انجام مراحل بعدی برای شناسایی توالی ژن فسفولیپاز D منتقل گردید.
سکوانس نوکلئوتیدی ژن pld1 کپک آسپرژیلوس فومیگاتوس به طول 550 نوکلئوتید به دست آمد که همسانی بسیار بالایی با توالی نوکلئوتیدهای ژن مشابه در سایر میکروارگانیسم ها را نشان می دهد.
مطالعات مربوط به تعیین سکوانس ژن ها عمدتا با هدف تعیین میزان مشارکت بیان ژن در بیماری زایی میکروارگانیسم؛ تعیین خصوصیات بیوشیمیایی و عملکرد فیزیولوژیک محصول ژن برای استنباط اطلاعات پایه جهت ارایه ی شیوه ی مصونیت بخشی، تهیه ی واکسن، دارو یا بلوکر برای محصول ژن و استفاده از محصول ژن به عنوان شاخص تشخیص عفونت صورت می گیرد و کلونینگ بخشی از ژن فسفولیپاز D به منظور شناسایی توالی کامل نوکلئوتیدهای این ژن برای رسیدن به اهداف فوق موثر خواهد بود.