تمایز سلول های بنیادی جنینی موشی به رده مگاکاریوسیتی در محیط کشت عاری از لایه تغذیه کننده

سلول های بنیادی جنینی، سلول های بالقوه چند ظرفیتی اند که ازتوده سلول داخلی مرحله بلاستوسیت جنینی مشتق می شوند. تاکنون تمایز سلول های بنیادی جنینی به رده مگاکاریوسیتی، از هم کشتی با سلول های استرومایی مغز استخوان بوده است که دارای معایبی چون احتمال انتقال آلودگی از لایه تغذیه کننده به سلول های بنیادی وهمچنین ترشح فاکتورهای نامشخص از این لایه در ایجاد تمایز ناخواسته و ایجاد تغییرات ژنتیکی در سلول های بنیادی جنینی می باشد.در این مطالعه با حذف لایه تغذیه کننده، سلول های بنیادی جنینی موش به رده مگاکاریوسیتی تمایز داده شد.
مطالعه انجام شده از نوع تجربی بود. به روش قطره گذاری آویزان، از سلول های بنیادی جنینی موش رده R1، اجسام شبه جنینی حاصل شدو سپس اجسام شبه جنینی، در دو گروه آزمون (محیط IMDM حاوی FBS، ال گلوتامین، اسیدهای آمینه غیرضروری،بتامرکاپتواتانول و فاکتورهای رشد TPO و IL3) وگروه کنترل(همان محیط کشت آزمون و فاقد فاکتورهای رشد) کشت شدند.بعد از گذشت 4 روز، آزمون سنجش کلونی و پس از 8 روز رنگ آمیزی ایمونوسیتوشیمی مولکول CD41 وآزمون نسخه برداری از ژن PF4 توسط RT-PCR برای اثبات تمایز به رده مگاکاریوسیتی انجام گرفت.
نتایج سنجش کلونی نشان داد که سلول های مورد نظر توانایی تشکیل کلونی را دارند. تعداد کل کلونی های تشکیل شده 1/6 ± 57 و کلونی های بنزیدین مثبت 6/3 ± 18 بود. از طرفی رنگ آمیزی ایمونوسیتوشیمی و RT-PCR نشان داد که مولکول CD41 و ژن PF4 در سلول های تمایز یافته بیان می شوند.
نتایج ما نشان داد که سلول های بنیادی جنینی موش بدون استفاده از لایه تغذیه کننده به رده سلول های مگاکاریوسیتی تمایز می یابند و می توان از سلول های بنیادی جنینی به عنوان منبع نامحدود وجدید برای تولید رده مگاکاریوسیتی وانجام تحقیقات پایه ای وبیولوژیکی این رده استفاده نمود.