ارزیابی جزء دوم حاصل از تفکیک آنتی ژنهای دفعی-ترشحی توکسوپلاسما به روش کروماتوگرافی تعویض یونی برای تشخیص توکسوپلاسموز در موش صحرایی

با توجه به گزارشات قبلی، به نظر می رسد که آنتی ژن های دفعی– ترشحی توکسوپلاسماگوندی نشانگرهای مناسبی جهت استفاده در تست های سرولوژی برای تشخیص توکسوپلاسموزیس باشند. چون در بررسی های قبلی معمولا«این آنتی ژن ها به صورت ترکیب کامل مورد استفاده قرار گرفته اند، این مطالعه به منظور ارزیابی روش الایزا با استفاده از اجزای آنتی ژن های دفعی–ترشحی تاکی زوئیت های توکسوپلاسما گوندی، برای تشخیص توکسوپلاسموزیس صورت گرفت.
ترکیب حاوی آنتی ژن های دفعی– ترشحی حاصل ار انکوباسیون تاکی زوئیت های توکسوپلاسما در محیط کشت غیرسلولی RPMI-1640به روش کروماتوگرافی تعویض یون تحت شیب pH، تفکیک و به روش الکتروفورز Native- PAGE شناسائی شدند. 40 سرموش صحرایی نر درون زاد (Inbred) با 10-7 هفته سن و غیرآلوده به توکسوپلاسما) Dye-Testمنفی(انتخاب و به هرکدام 106×4 تاکی زوئیت توکسوپلاسما از طریق داخل صفاقی تزریق و سرم روزهای 8،15،22،60 بعد از آلودگی آنها تهیه شد در مرحله بعد نمونه های سرم به روش dye-test آزمایش و باتوجه به نتایج آن، سرم های مورد نظر انتخاب و به روش الایزا با استفاده از اجزاء آنتی ژن های دفعی– ترشحی آزمایش شدند.
با توجه به نتایج آزمایش سرم روزهای مختلف رتهای آلوده، سرم روز60 و 15 بعنوان نمونه های مناسب انتخاب شدند. تحت شرایط مورد نظر در این بررسی، Cut-off تست الایزا با 99 درصد اطمینان برابر41/.تعیین گردید که میزان جذب نوری (OD) تمام نمونه سرم های روز 15 آلودگی، سه تا از نمونه سرم های روز60 آلودگی و دو مورد از سرم های منفی بالاتر از آن بدست آمد. بنابراین تحت شرایط موردنظر در این مطالعه حساسیت و ویژگی روش الایزا با استفاده از جزء دوم کروماتوگرافی تعویض یون برای شناسائی سرم روز 15 بعد از آلودگی به توکسوپلاسما و افتراق آن از روز60 آلودگی به ترتیب 100 درصد و 91 درصد می باشد.
باتوجه به یافته ها چنین استنباط می شود که جزء دوم کروماتوگرافی تعویض یون تهیه شده تحت شرایط این مطالعه نشانگر مناسبی برای تشخیص و افتراق سرم مراحل مختلف توکسوپلاسموزیس به نظر می رسد.