بررسی بیان ژن اینوزین تری فسفات پیروفسفوهیدرولاز در سلول های K562

تحقیق ما بیان ژن ITPA را به عنوان یک عامل زمینه ساز ایجاد اختلالات ژنتیکی مشاهده شده در این سلول ها ارزیابی شد. برای ارزیابی بیان ژن مورد نظر از روش RT-PCR نیمه کمی استفاده و برای بررسی صحت عملکرد محصول ژن cDNAهای به دست آمده کلون و تعیین توالی شد. پروتئین های حاصل از cDNAها با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیکی از نظر ساختمانی پیشگویی و مقایسه شدند. نتایج حاصل از پیش بینی ساختمانی بیانگر آن است که mRNA جدا شده قادر به کد کردن پروتئینی است که فاقد کارایی لازم در اتصال به سوبسترا و انجام واکنش آنزیمی است. با توجه به لزوم تشکیل دایمر برای فعالیت طبیعی پروتئین، عملکرد مونومر طبیعی ITPase نیز در هنگام تشکیل هترودایمر تحت تاثیر قرار می گیرد. بنابراین به نظر می رسد که عمل آنزیمی ITPase در سلول هایK562 طبیعی نبوده و می توان آن را به عنوان یک عامل زمینه ساز ناپایداری ژنتیکی در این سلول ها در نظر گرفت. بررسی بیان ژن در سلول های K562 نشان داد که در مقایسه با بیان ژن کنترل داخلیGAPDH، ITPA بیانی در حد متوسط در این سلول ها داشته و دو نوع رونوشت در این سلول ها تولید می کند. یکی از آنها حاصل پردازش طبیعی hnRNA اولیه است ولی رونوشت دوم دارای یک حذف 51 نوکلئوتیدی در ناحیه کد کننده mRNA است. به نظر می رسد که این رونوشت حاصل یک پیرایش نادر در سلول است.