تعیین بیان ژن شماره 52 ویروس واریسلا زوستر با استفاده از روش DNA واکسن

ژنوم ویروس واریسلا زوستر (VZV) مشابه هر هفت ژن لازم برای همانندسازی in vitro از منشاء Oris ویروس هرپس سیمپلکس (1-HSV) برخوردار است. این هفت ژن VZV در پلاسمیدهای جدا کلون شده اند، اما نتوانسته اند همانندسازی وابسته به منشاء را نشان دهند. برای مطالعه احتمال نیاز این ویروس به ژن های دیگر دخیل در همانندسازی، نخست باید از بیان ژن های کلون شده اطمینان حاصل شود. در این بررسی یکی از ژن های بررسی نشده یعنی ژن 52 ویروس، که مشابه 18U در 1-HSV می باشد و یک زیر واحد از کمپلکس سه زیر واحدی هلیکاز- پریماز را کد می کند، انتخاب شد. برای بررسی بیان این ژن بعد از کلونینگ به دلیل نداشتن آنتی بادی اختصاصی از روش DNA واکسن استفاده شد تا در صورت بیان ژن کلون شده در in vivo، بر ضد آن آنتی بادی تولید شود و در in vitro بتواند بیان ژن را نشان دهد. نتایج و بحث: پس از تزریق اول و دوم DNA به موش های Balb/c احتمالا به دلیل غیر ترشحی بودن پروتئین، میزان آنتی بادی تولید شده در سرم موش به اندازه کافی نبود. اما با تزریق سوم، میزان آنتی بادی به مقدار زیاد، افزایش یافت و توانست تولید پروتئین را با توجه به وزن پیشگویی شده به وسیله برنامه های کامپیوتری، KD78، در ایمنوبلاتینک نشان دهد. به منظور اطمینان از صحت و طبیعی بودن پروتئین 52 بیان شده به وسیله پلاسمید، آنتی بادی پلی کلونال تولید شده، بر ضد یکی از چهار کاسمید VZV در بردارنده کل ژنوم ویروس تست شد. علاوه بر این، توانایی آنتی بادی برای تشخیص پروتئین 8-1U نیز ثابت شد که نشان دهنده شباهت ساختمانی و فضایی بین این دو پروتئین است.