کلونینگ ژن p4 لیشمانیا ماژور

ژن p4 لیشمانیا ماژور، در مرحله آماستیگوت انگل بیان می شود که احتمالا ترکیب مناسب جهت تهیه واکسن بر علیه لیشمانیوز است. هدف از انجام این پژوهش، کلون این ژن در یک وکتور (ناقل) مناسب برای مطالعات بیشتر در زمینه واکنس سازی بود.
این بررسی به صورت تجربی انجام گرفته است. در مرحله پروماستیگوت، لیشمانیا ماژور در محیط N.N.N و سپس در محیط RPMI1640 به صورت انبوه کشت داده شد. در ادامه DNA ژنومی انگل با روش جوشان استخراج شد. سپس PCR با پرایمرهای اختصاصی ژن p4 انجام شد. محصول PCR از روی ژل آگاروز خالص سازی شد و در پلاسمید نو ترکیب غربالگری شد و تحت تاثیر آنزیم های برش دهنده قرار گرفت.
واکنش PCR و سپس کلون قطعه p4 در T-Vector به درستی انجام شد. پلاسمید حاوی قطعه استخراج وژن کلون شده در آن با آنزیم های برش دهنده، جدا شد و پلاسیمد بیان PQE-30 با موفقیت ساب کلون شد و سپس توسط آنزیم های برش دهنده و انجام PCR روی پلاسمید بیان، تایید شد.
این ترکیب ماده بیان، ژن p4 در آزمایشگاه است. تولید آنتی ژن نو ترکیب P4 می تواند، به خصوص در زمینه تهیه واکنس، پاکار آید و علاوه بر آن در زمینه های هدف دارویی و تست های تشخیصی نیز قابل استفاده است.