تعیین گونه های سارکوسیستیس گوسفندان ذبح شده در کشتارگاه زیاران قزوین با روش PCR-RFLP

سارکوسیستیس از شاخه اپی کمپلکسا است که زندگی دو میزبانه اجباری دارد. علف خواران (میزبان واسط) با خوردن آب و غذای آلوده به اسپروسیست ها که توسط گوشت خواران (میزبان اصلی) دفع می شود، آلوده می شوند و متعاقب آن کیست های نسجی در احشاء ایجاد می شود. هدف از مطالعه حاضر شناسایی گونه های مختلف سارکوسیستیس گوسفندان با استفاده از PCR-RFLP بوده است.
در مطالعه حاضر مجموعا 60 نمونه بافتی از عضلات قلب، مری و دیافراگم از گوسفندان ذبح شده در کشتارگاه زیاران قزوین جمع آوری شد که 40 نمونه آن حاوی کیست های ماکروسکوپی و 20 نمونه آن حاوی کیست های میکروسکوپی بود. تخلیص DNA نمونه ها با استفاده از کیت صورت گرفت. شرایط PCR برای تکثیر قطعه rRNA s18 بهینه شد. برای بررسی اختصاصی بودن، آغازگرهای نمونه های DNA نئوسپورا و توکسوپلاسما نیز در کنار نمونه های سارکوسیستیس تحت مطالعه قرار گرفت. برای تعیین گونه سارکوسیست های تحت مطالعه، با توجه به موقعیت محل برش آنزیم های برش دهنده، اقدام به انتخاب آنزیم شد.
نتایج نشان داد که آغازگرها کاملا اختصاصی بوده و جنس سارکوسیستیس را از سایرین متمایز می سازد. ارزیابی PCR-RFLP روی نمونه ها نشان داد که کیست های ماکروسکوپی متعلق به سارکوسیستیس ژیگانته آو کیست های میکروسکوپی متعلق به سارکوسیستیس آریتی کنیس است.
با استفاده از آغازگرهای طراحی شده و برمبنای روش PCR-RFLP گونه های سارکوسیستیس گوسفندی را می توان از هم تفکیک داد. در این روش برای تفکیک گونه های متعلق به کیست های میکروسکوپی گوسفندانTaqI و برای تفکیک گونه های متعلق به کیست های ماکروسکوپیTaqI و HincII موثرتر از سایرین هستند.