بیان موقت پروتئین هورمون رشد انسانی در برگ گیاه دارویی یونجه

با توجه به اهمیت هورمون رشد انسانی در درمان دارویی بسیاری از نارسایی های ناشی از کمبود آن، تولید این هورمون به صورت نوترکیب در داخل و خارج کشور مورد توجه قرار گرفته است. در حال حاضر از روش ها و موجودات مختلفی برای تولید مولکول های نو ترکیب دارویی که از اهمیت تجاری برخوردار هستند استفاده می گردد، به طوری که یافتن جایگزینی مناسب برای تولید مولکول های نو ترکیب از اهمیت ویژه ای برخوردار است. در دهه اخیر، تولید پروتئین های نو ترکیب دارویی در گیاهان، بخصوص انواعی از آن ها که ارزش دارویی و تغذ یه ای دارند، همانند یونجه، مورد توجه قرار گرفته است.
هدف آن است که پتانسیل گیاه یونجه، به عنوان یک گیاه زود رشد و به عنوان تولید کننده پروتئین نو ترکیب مورد بررسی قرار گیرد.
در این تحقیق با استفاده از روش آگرواینفیلتراسیون (انتقال ژن تحت خلا توسط آگروباکتریوم) آگروباکتریوم حاوی سازه بیانی هورمون رشد انسانی به بافت برگ های سالم یونجه در زمان های مختلف 5، 10، 15، 20، 25، 30 و 35 دقیقه وارد شد. میزان بیان موقت پروتئین در برگ ها با استفاده از کیت الایزا (ELISA) مربوط به سنجش هورمون رشد انسانی استاندارد و لکه گذاری پروتئین (Western blot) اندازه گیری شد.
بهترین میزان بیان هورمون رشد انسانی مربوط به برگ جوان گیاه یونجه با مدت زمان 25 دقیقه آگرواینفیلتریشن و نگهداری به مد ت سه روز در شرایط نوری 8 ساعت تاریکی، 16 ساعت روشنایی با میزان 6000-8000 لوکس و دمای 25 درجه سانتی گراد به میزان 1/0 درصد کل پروتئین استخراج شده از برگ بود.
نتیجه گیری و بحث: این بررسی حاکی است که گیاه دارویی یونجه می تواند به عنوان عامل تولید پروتئین های نوترکیب، مانند پروتئین های تشخیصی و یا واکسن ها به کار رود. این روش بدون نیاز به تجهیزات پیشرفته قابل انجام و از نظر اقتصادی مقرون به صرفه است. از مزایای برتر این سامانه این است که بیان سازه حاوی ژن مورد نظرقبل از تراریختی دائمی گیاهان مشخص می شود.