غنی سازی سلولهای دندریتیک دست نخورده خون محیطی به روش بید مغناطیسی متصل به آنتی بادی

جدا سازی سلولهای دندریتیک (DCs) خون محیطی به صورت دست نخورده (Intact Peripheral Blood Dendritic Cells) با استفاده از روش انتخاب منفی (Negative Selection) به کمک روش روزت و Immunomagnetic depletion

در ابتدا سلولهای تک هسته ای خون محیطی با استفاده از فایکول جدا شده و لنفوسیتهای T با اتصال به گلبولهای قرمز گوسفند تیمار شده با AET حذف گردیدند. سلولهای دارای شاخص های رده ایی (Lineage Marker) با استفاده آنتی بادی های مونوکلونال (mAbs) اختصاصی ضد شاخص های رده ایی CD3، CD11b، CD14، CD16، CD19، CD56 و بیدهای مغناطیسی واجد anti-mouse IgG از سلولهای باقیمانده خارج شدند. درصد خلوص سلولهای دندریتیک به دست آمده با دو خصوصیت عدم حضور شاخص های رده ایی و حضور آنتی ژن HLA-DR، با استفاده از دستگاه فلوسایتومتر اندازه گیری شد.

نتایج به دست آمده از بررسی های فلوسیتو متری نشان می دهد که جمعیت قابل توجهی (5/4درصد±5/58درصد) از سلولهای جدا شده قادر به واکنش با mAbهای ضد شاخصهای رده ایی نیستند ولی آنتی ژن HLA-DR را ابراز می کنند.

روش Immunomagnetic depletion روشی جدید برای جداسازی DCs است که برخلاف روش های کلاسیک مطرح، قادر به جداسازی DCs به صورت دست نخورده است. این تحقیق، نخستین تحقیق در این زمینه در کشور است و میزان خلوص DCs به دست آمده در این بررسی مشابه مطالعات خارجی است. غنی سازی بالای DCs دست نخورده، راه مطالعه در مورد عملکردطبیعی DCs در زمینه های مختلف اتوایمنی، سرطان ها و بیماری های عفونی را هموار می نماید.