شناسایی گونه های انگل لیشمانیای جدا شده از بیماران مبتلا به کالاآزار به روش واکنش زنجیره ای پلی مراز یک مرحله ای

لیشمانیوز احشایی (کالاآزار) بیماری انگلی مهمی است که توسط گونه های لیشمانیای دونوانی و اینفانتوم ایجاد می شود. شواهد اپیدمیولوژی نشان می دهد که لیشمانیوز احشایی در بعضی از مناطق شهرستان جهرم از استان فارس شایع است. مطالعه حاضر با هدف تعیین هویت عامل ایجاد کننده لیشمانیوز احشایی در این شهرستان انجام شد.
در این مطالعه تجربی از 16 نفر بیمار مبتلا به کالاآزار بستری شده در بیمارستان شهید مطهری جهرم در طی سال های 1377 تا 1383 نمونه مغز استخوان گرفته شد. دی ان آاز اسلایدهای میکروسکوپی تهیه شده از این نمونه ها استخراج و گونه انگل با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) اختصاصی تعیین شد. برای این کار با استفاده از پرایمر LINR4 و LIN17 قطعه متغیر از حلقه های کوچک دی ان آی کینتوپلاستی انگل لیشمانیا تکثیر و روی ژل آگاروز 5/1 درصد الکتروفورز شد.
تمامی بیماران از نظر سرولوژی با استفاده از آزمون ایمونوفلوروسنت غیرمستقیم مثبت بودند. در بررسی اسمیرهای مستقیم مغز استخوان، آماستیگوت های انگل (اجسام لیشمن) به تعداد زیاد مشاهده شد. تمامی نمونه ها در آزمایش واکنش زنجیره ای پلی مراز باندی به اندازه 720 جفت باز ایجاد کردند. مقایسه این باندها با باندهای گونه های استاندارد، مشخص نمود که گونه انگل در تمامی بیماران لیشمانیا اینفانتوم است.
نتایج این مطالعه نشان داد که تعیین گونه با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز یک مرحله ای و پرایمرهای LINR4 و LIN17 روشی ساده و سریع است. همچنین عامل لیشمانیوز احشایی در بیماران تحت بررسی لیشمانیا اینفانتوم می باشد.