ایجاد پاسخ ایمنی علیه پروتئین نوترکیب ناحیه N- ترمینالIpaD شیگلا دیسانتریه در خوکچه هندی

شیگلوزیز به عنوان یک بیماری واگیر دار، سالانه زندگی میلیون ها نفر را در سرتاسر جهان تهدید می کند. ایجاد سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک، سبب شده که سازمان بهداشت جهانی تهیه واکسن علیه این بیماری را در اولویت قرار دهد. این باکتری به کمک عوامل تهاجمی خود با اتصال به M-cellهای جدار روده، ایجاد اسهال خونی شدید می نماید. پروتئین IpaD نقش مهم و کلیدی در تهاجم شیگلا دارد. عملکرد IpaD به ناحیه N- ترمینال آن وابسته است. هدف از این مطالعه تولید و تخلیص آنتی بادی پلی کلونال علیه ناحیه N- ترمینال IpaD می باشد. جهت تخلیص پروتئین نوترکیب از ستون کروماتوگرافی تمایلی نیکل استفاده گردید. از پروتئین تخلیص شده جهت تولید آنتی بادی پلی کلونال درخوکچه هندی استفاده شد. تیتر آنتی بادی تولیدی به وسیله تست الایزا بررسی گردید. این آنتی بادی پس از تخلیص با ستون پروتئین G، به وسیله وسترن بلات بررسی شد. نتایج حاصل از وسترن بلات تایید کننده پروتئین بیانی تخلیص شده بود. تست الایزا تیتر بالایی از آنتی بادی در سرم حیوانات ایمن با این پروتئین را نشان داد. صحت آنتی بادی پلی کلونال تخلیص شده با ستون کروماتوگرافی پروتئین G به وسیله ایمنوبلات تایید شد.