مقایسه ی روش های کشت میکروبی و PCR در تعیین آلودگی رده های سلولی به مایکوپلاسما

مایکوپلاسماها از آلوده کنندگان اصلی رده های سلولی هستند که به عنوان مشکل عمده ی اقتصادی و بیولوژیکی در زمینه های تحقیقات پایه تشخیص و فرآورده های بیوتکنولوژی در نظر گرفته می شود. تشخیص مایکوپلاسما در کشت های سلولی ابتدا به وسیله ی کشت میکروبی آغاز شد و سپس رنگ آمیزی DAPI و آزمایش های سرولوژی از قبیل آزمایش ایمونوفلورسانس غیر مستقیم، آزمایش DNAprobe، PCR-ELISA، PCR و Real-Time PCR برای شناسایی مایکوپلاسما توسعه یافت.
در این مطالعه، یک روش سریع حساس اختصاصی برای تشخیص گونه های مختلف مایکوپلاسما در کشت های سلولی مورد استفاده قرار گرفت. این روش بر اساس واکنش PCR و با استفاده از پرایمرهای اختصاصی جنس 11 گونه ی مختلف مایکوپلاسما انجام گرفت.
از 183 رده ی سلولی مختلف موجود در بانک سلولی مورد بررسی با روش PCR 6/48 درصد رده های سلولی آلودگی به مایکوپلاسما را نشان داد؛ در حالی که با روش کشت میکروبی 3/27 درصد از رده های سلولی آلودگی به مایکوپلاسما را نشان دادند. نتایج به دست آمده توسط روش PCR در مقایسه با روش کشت میکروبی حساسیت 100 درصد و ویژگی 7/70 درصد را نشان داد نتایج به دست آمده با استفاده از پرایمرهای اختصاصی گونه های مختلف مایکوپلاسما نشان داد که مهم ترین و عمده ترین گونه های آلوده کننده ی رده های سلولی به ترتیب اهمیت آلودگی شامل مایکوپلاسما فرمانتانس، مایکوپلاسما آرجینینی، مایکوپلاسما هیوراینیس و مایکوپلاسما اورال بودند. این مطالعه همچنین نشان داد که برخی از رده های سلولی با بیش از یک گونه مایکوپلاسما آلوده بودند.