به کارگیری روش NASBA Real-time با استفاده از Molecular Beaconبرای تشخیص ویروس HCV

سابقه و هدف هپاتیت C، شایع ترین بیماری ویروسی قابل انتقال از طریق خون، در میان معتادان تزریقی می باشد. در مطالعه حاضر یک روش تکثیر اسید نوکلئیک هم دما (NASBA) در ترکیب با روش Real-time بر اساس پروب Molecular Beacon برای ردیابی ویروس HCV مورد استفاده قرار گرفت.
مواد و روش ها در یک مطالعه تجربی، طراحی جفت آغازگر و پروب برای ناحیه حفاظت شده 5''NCR ویروس HCV به طول bp 241 با نرم افزارهای اختصاصی انجام شد. در مقایسه با نمونه استاندارد، حساسیت تشخیص حضور RNA ویروس تا copies/ml 500 در 100% موارد قابل آشکارسازی بود.
یافته ها در مطالعه انجام شده، تنها یک نمونه مثبت سرولوژیک از نظر HCV با روش NASBA منفی شد، لذا حساسیت کلینیکی واکنش 6/96% بود. هم چنین توالی یابی در پایگاه NCBI Nucleotide Blast نشان داد اختصاصیت آنالیتیکی روش 100% بوده و با ژنوم هیچ یک از ویروس ها یا توالی ژنوم انسان تداخلی نداشته است. بررسی 10 نمونه منفی از نظر سرولوژی با روش جدید طراحی شده، نشان دهنده اختصاصیت کلینیکی 100% بود.
نتیجه گیری در نهایت، روش NASBA Real-time به علت داشتن طبیعت هم دما، سرعت و تکثیر اختصاصی RNA، روش بسیار مناسبی بوده و می تواند کاربرد وسیعی در تشخیص سریع ویروس HCV در نمونه های پلاسما داشته باشد.