فهرست مطالب

سلول و بافت - سال یازدهم شماره 2 (تابستان 1399)

مجله سلول و بافت
سال یازدهم شماره 2 (تابستان 1399)

  • تاریخ انتشار: 1399/06/28
  • تعداد عناوین: 6
|
  • زهرا شمس، بابک اکبری، سارا رجبی، ناصر اقدمی صفحات 87-99
    هدف

     در این پژوهش، تهیه یک داربست ترکیبی با دارا بودن شرایط مورد نیاز جهت رشد، تکثیر و تمایز سلول های پروژنیتور قلبی، مورد توجه قرار گرفت.

    مواد و روش‏ها

    داربست ترکیبی با نانوفیبرهای موازی از پلیمرهای پلی کاپرولاکتون و ژلاتین با درصد ترکیبی 70 به 30 و با بیش‏ترین شباهت از لحاظ ساختار موازی نانوفیبرها، قدرت الاستیسیته و هم‏گونی نانوفیبرها با ماتریکس خارج سلولی قلب توسط روش الکتروریسی تهیه شد. با استفاده از تصاویر میکروسکوپ الکترونی و آزمون های زاویه تماس و آنالیز استحکام مکانیکی در جهت نانوفیبرها، داربست ترکیبی ایجاد شده، به‏منظور دارا بودن بیش‏ترین مشخصات مورد نیاز جهت داربست قلبی، مورد بررسی قرار گرفت. در نهایت از آزمون Real time-PCR به‏منظور بررسی میزان بیان ژن های مرتبط با تمایز سلول های پروژنیتور قلبی (MYH-6, TTN and CX-43) استفاده شد.

    نتایج

     آزمون های زاویه تماس و آنالیز استحکام مکانیکی نشان داد که داربست از نظر چسبندگی و  استحکام شرایط مناسبی برای کشت سلول های پروژنیتور قلبی را دارا بوده و آزمون Real time-PCR نیز نتایج خوبی از بیان ژن های مرتبط با ضربان سلول های کشت داده شده بر روی داربست را در برداشت.

    نتیجه ‏گیری

    از آن‏جاکه مهم ترین تفاوت سلول قلبی با سایر سلول های بدن در داشتن ضربان است که ژن های خاصی مسیول هم‏زمان سازی آن هستند، نتایج این پژوهش نشان داد که داربست تولید شده می تواند گزینه مناسبی برای القای تمایز سلول های پروژنیتور قلبی و مهندسی بافت قلب باشد.

    کلیدواژگان: بیان ژنهای قلبی، داربست الکتروریسی، سلولهای پروژنیتور قلبی، مهندسی بافت قلب
  • الهام حویزی، فاطمه پورعطار، مهناز کسمتی *، علی شهریاری صفحات 100-112
    هدف

     هدف از مطالعه‏ی حاضر بررسی اثرات سمی و اکسیداتیو عصاره هیدروالکلی مریم‏گلی بر سلول های سرطانی رده A549 می‏باشد.  

    مواد و روش‏ها

    برای بررسی غلظت های عصاره مریم گلی، سلول ها در ظروف مخصوص کشت و سنجش MTT برای تعیین IC50 و توان زیستی سلول در روزهای 1، 3، 5 و 7 انجام شد. هم‏چنین برای بررسی اثرات تیمار غلظت IC50 بر القای آپوپتوزیس، از سنجش آنزیمهای سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز دخیل در مسیر استرس اکسیداتیو و رنگ‏آمیزی اکریدین اورنج استفاده شد. به‏علاوه، از رنگ‏آمیزی گیمسا و DAPI به‏منظور بررسی تغییرات مورفولوژیکی سلول و هسته استفاده شد.

    نتایج

     غلظت IC50 عصاره مریم گلی برای سلول های A549 5 میلی‏گرم بر میلی‏لیتر به‏دست آمد. براساس نتایج، عصاره مریم‏گلی به‏صورت معنی داری تاثیر سیتوتوکسیک بیش‏تری بر رده سلولی A549 در مقایسه با نمونه کنترل داشت. سلول های A549 تحت تیمار با عصاره، در زمان های مختلف تفاوت بارز و وابسته به دوزی را نشان دادند. نتایج حاصل از رنگ‏آمیزی ها، تاییدی بر القای آپوپتوزیس در گروه تیمار بود. هم‏چنین نتایج بیان آنزیمی نشان داد که فعالیت آنزیم های سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز در گروه تیمار در مقایسه با گروه کنترل به‏طور معنی داری افزایش یافت.

    نتیجه‏ گیری

    براساس نتایج فوق، عصاره هیدروالکلی مریم‏گلی ضمن القا فعالیت آنتی اکسیدانتی، اثر آپوپتوتیک قابل ملاحظه‏ای به‏صورت وابسته به دوز و زمان بر سلول های سرطانی ریه دارد.

  • سیما مشایخ*، حسین جلالی، مهناز آذرنیا صفحات 113-126
    هدف

     هدف از انجام این پژوهش تجربی بررسی عوامل موثر ناباروری ترکیبات فیزالین بر روی دستگاه تناسلی موش ماده بالغ Balb/c است.

    مواد و روش‏ها

    آزمایش فوق با تهیه عصاره آبی گیاه و انتخاب سه دوز 5/7 گرم بر کیلوگرم، 9 گرم بر کیلوگرم و 15 گرم بر کیلوگرم انجام گرفت، هم‏زمان با گروه های تجربی، به‏گروه سم آب مقطر تزریق و گروه کنترل نیز به‏شکل دست نخورده نگه‏داری شد. جهت بررسی مراحل مختلف سیکل استروس اسمیر واژن تهیه می‏شد. یک ساعت بعد از آخرین تزریق از موش ها خون‏گیری و سپس به‏وسیله کلروفرم کشته و رحم و تخمدان آن ها جهت مطالعات بافت شناسی آماده شدند.

    نتایج

     بررسی‏های آماری نشان داد که تزریق عصاره با دوز 5/7 گرم بر کیلوگرم موجب کاهش استروژن و برگشت 33 درصد باروری درموش‏ها می‏شد. همچنین در دوز 9 گرم بر کیلوگرم ابتدا همه موش ها نابارور ولی بعد از گذشت یک ماه از آخرین تزریق 5/16 درصد موش ها برگشت باروری و افزایش معنیدار پروژسترون را  نشان دادند.

    نتیجه‏ گیری

    طبق نتایج به‏دست آمده احتمالا به‏علت آن‏که فیزالین ها دارای ساختمان شبه استروییدی هستند، گیرنده توسط فیزالین اشغال و می‏تواند موجب بی‏نظمی در رشد و نمو اووسیت، سلول‏های بافت رحم و تخمدان و ناباروری شود.

    کلیدواژگان: فیزالین، گیاه عروسک پشت پرده، رحم، تخمدان، ناباروری
  • عرفانه شایگان‏ نیا، محمدحسین نصراصفهانی*، فتاح ستوده نژاد نعمت الهی، کاظم پریور صفحات 127-138
    هدف

     هدف از مطالعه حاضر آن است که با استفاده از مزیت کار با حیوانات آزمایشگاهی، تاثیر القا واریکوسل به‏صورت تجربی در رت‏های نر، بر روی سلامت DNA بررسی گردد.

    مواد و روش‏ها

    66 رت نر نژاد ویستار در سه گروه کنترل، شم و واریکوسل تقسیم گردیدند. دو ماه پس از القا واریکوسل، تمامی رت‏ها آسان‌کشی شده و پارامترهای اسپرمی، آسیب DNA اسپرم، میزان هیستون‏های پایدار، جایگزینی هیستون با پروتامین و نیز درصد لیپید پراکسیداسیون مورد بررسی قرار گرفتند.

    نتایج

     اندازه‏ گیری وزن حیوانات و طول اپیدیدیم در بین گروه‏ها تغییر معنی‌داری نشان نمی‌دهد، اما حجم بیضه و پارامترهای اسپرمی میان گروه‌ها تفاوت معنی‌داری دارد. افزایش معنی‌دار میزان پراکسیداسیون لیپیدی، درصد جایگزینی هیستون با پروتامین، درصد هیستون‏های پایدار و درصد شکست DNA، در گروه واریکوسل مشاهده شد.

    نتیجه‏ گیری

    بر اساس مطالعات قبلیو نتایج مطالعه حاضر، به نظر می‌رسد افزایش استرس اکسیداتیو در پی القا واریکوسل موجب پراکسیداسیون لیپیدی، ایجاد آسیب DNA در اسپرم، و به‏دنبال آن کاهش پارامترهای اسپرمی می‌شود. در مطالعه حاضر، با استفاده از مزیت ژنتیک یکسان موش‌های صحرایی و تعداد بالا آن‏ها نشان دادیم که واریکوسل بر روی سلامت کروماتین و DNA اثر دارد و باید قبل از اقدام برای باروری در انسانها درمان گردد.

    کلیدواژگان: آسیبهای اکسیداتیو، آسیبهای لیپیدی، آسیب DNA اسپرم، واریکوسل
  • احمدرضا فرمانی، مائده محمد‏صالحی، فروغ مهدوی نژاد، مهسا کوهستانی، صادق محمدی، جعفر آی * صفحات 139-153

    وجود عملکرد الکتریکی در اعضای بدن مانند دستگاه عصبی، قلب و استخوان سبب شده است که یکی از روش‏های درمانی پرکاربرد به نام الکتروتراپی به ویژه در تسکین دردهای مضمن کاربرد فراوان داشته باشد. از طرفی پیشرفت علوم پزشکی در حوزه سلول‏های بنیادی و پزشکی بازساختی نویدهای بسیاری را در درمان ایجاد کرده است. هم‏چنین اخیرا درمان‏های بر پایه میدان الکتریکی کاربرد وسیعی در درمان سرطان یافته‏اند. مسایل اصلی در پزشکی بازساختی، تکثیر سلول‏های بنیادی به‏میزان مورد نیاز و هدایت آن‏ها به‏سمت تمایز به بافت هدف است. تحریک با میدان الکتریکی (EF)  می‏تواند نقش مهمی در ایجاد پاسخ‏های مناسب سلول‏های بنیادی و هدایت تمایز سلول‏های بنیادی به‏سمت استخوان‏زایی/ نورون‏زایی/ کاردیومیوژنز ایفا کند. میدان الکتریکی با پالس نانو ثانیه و هم‏چنین میدان الکتریکی درمانی تومور امروزه توجه بسیار زیادی را جهت درمان سرطان به‏خود جلب کرده‏اند. مسیرهای اصلی سیگنالینگ و پاسخ‏های سلولی که با تحریک الکتریکی حاصل می‏شوند، شامل گونه‏های اکسیژن فعال و پروتئین‏های شوک حرارتی، نوسان غلظت یون کلسیم داخل سلولی، تولیدATP ، خوشه‏بندی یا تجمع مجدد گیرنده‏های سطح سلول، بازسازی اسکلت سلولی می‏باشند که بر سرنوشت سلول بنیادی موثر هستند. هم‏چنین عدم دردناکی، سهولت و نیز قیمت مناسب سبب شده است تا درمان سرطان با میدان الکتریکی کاربرد روزافزونی داشته باشد. در این پژوهش تلاش شده تا مرور مختصری بر تاثیرات سیگنال الکتریکی بر رفتار سلول های بنیادی و همچنین نمونه‏هایی از آثار درمانی آن‏ها در درمان ضایعات بافتی و نیز سرطان انجام گیرد.
     

    کلیدواژگان: سلولهای بنیادی، تحریک الکتریکی، پزشکی بازساختی، اثرات درمانی، درمان سرطان
  • فرنوش آزادی، مهدی خدایی‏ مطلق*، عبدالله محمدی سنگ چشمه، احسان سیدجعفری صفحات 154-166
    هدف

     هدف از مطالعه‌ی حاضر بررسی اثر غلظت‌های مختلف جنستیین بر تکثیر و تمایز سلول‌های بنیادی مزانشیمی جدا شده از بافت چربی اسب ترکمن به سلول‌های استخوانی بود.

    مواد و روش‏ها

    در این مطالعه، سلول های مزانشیمی با غلظت‌های متفاوت 0، 8-10، 7-10، 6-10، 5-10 میکرومولار جنستیین و محیط تمایزی استخوان کشت داده شدند. در طول 21 روز، برای ارزیابی تکثیر و زنده‏مانی از آزمونMTT  و نقش غلظت های مختلف جنستیین در تمایز استخوانی از آزمایش های آلیزارین‏رد، سنجش آنزیم آلکالین فسفاتاز و میزان رسوب کلسیم استفاده شد. داده‌های حاصل در قالب آنالیز واریانس یک‏طرفه ANOVA تجزیه شدند.

    نتایج

     نتایج نشان داد که جنستیین اثر منفی بر روی زنده مانی سلول‏های مورد آزمایش نداشت (05/0<p). تفاوت معنی داری در فعالیت آنزیم الکالین فسفاتاز در روز 21 در غلظت 5-10 و سایر گروه ها مشاهده شد (05/0>p). میزان رسوبات کلسیمی در روزهای 14 و 21، بین غلظت بیشینه ی جنستیین (5-10) و دیگر غلظت ها دارای تفاوت معنی داری بود (05/0>p). 

    نتیجه ‏گیری

    نتایج نشان داد که افزودن جنستیین بر تمایز سلول های بنیادی جدا شده از بافت چربی، باعث بهبود روند تمایز استخوانی بدون اثر سمیت می شود.

    کلیدواژگان: اسب ترکمن، جنستئین، تمایز استخوان، سلول بنیادی مزانشیمی
|
  • Z Shams, B Akbari *, S Rajabi, N Aghdami Pages 87-99
    Aim

     This research, design and fabrication of a composite scaffold for growth, proliferation and differentiation of Cardiac Progenitor Cells (CPCs) has been considered.

    Material and method

     Polycaprolactone / Gelatin composite scaffolds with a ratio of 70:30 and with the most similarities to the cardiac extracellular matrix was fabricated with aligned nanofibers. Using scanning electron microscopy (SEM), mechanical strength analysisand also contact angel test, the scaffold was investigated due to have the most necessary characteristics to be proportional for cardiac scaffold. Finally, By Real time-PCR test, the expression of the specific genes related to the Cardiac Progenitor Cells differentiation (MYH-6, TTN and CX-43) has been analyzed.

    Results

     Based on our results from contact angle test and mechanical strength experiments, we concluded that our designed scaffold is suitable for the culture of Cardiac Progenitor Cells on it. The Real time-PCR analysis also showed the good expression of genes associated with contraction.

    Conclusion

     What makes the cardiomyocytes different from other cells is their contraction related to specific cardiac genes being responsible for beating synchronization. The results of this study showed that aligned Polycaprolactone / Gelatin composite scaffold has the appropriate potential for induction of cardiac progenitor cells differentiation and application in heart tissue engineering.

    Keywords: Electrospun Scaffold, Cardiac Genes Expression, Cardiac Progenitor Cells, Cardiac Tissue Engineering
  • E Hoveizi, F Pouratar, M Kesmati *, A Shahriari Pages 100-112
    Aim

     The purpose of the current study is to investigate the cytotoxic and oxidative effects of Salvia officinalis hydroalcoholic extract on cancer A549 cells.

    Material and Methods

    The cells were seeded in plates to investigate concentrations of Salvia officinalis extract and MTT measurement was done to determine IC50 concentration and cell viability on days 1, 3, 5, and 7. Moreover, analyses of superoxide dismutase and catalase enzymes involved in oxidative stress pathway, and AO/EB staining for a qualitative investigation of cell lines has been conducted in order to explore the effects of IC50 concentration on apoptosis induction. Also, Giemsa and DAPI stainings were utilized to explore the morphological changes of cell and nucleus..

    Results

     IC50 concentration of Salvia extract for A549 cells was determined 5 mg/mL. According to the results, Salvia extract reduced the cell viability of A549 cells. Based on the results, Salvia extract had a significantly greater cytotoxic effect compared to the control sample of A549 cell line. Treatment cells indicated some clear and dose-dependent differences at different times. The results of stainings proved the apoptosis induction in the treatment group. Furthermore, regarding the enzyme expression results the activity of superoxide dismutase and catalase enzymes in the cell groups treated by Salvia extract was significantly increased, compared to the control group.

    Conclusion

     Consistent with the results of this study, in addition to the anti-oxidative activity Salvia officinalis hydroalcoholic extract revealed significant apoptotic effects on lung cancer cells, considering a time and dose-dependent method.

    Keywords: Lung Cancer, Salvia officinalis, Apoptosis, Oxidative Stress
  • S Mashayekh, H Jalali, M Azernia Pages 113-126
    Aim

    The aim of this experimental study was to investigate the effective infertility factors of physoaline compounds on the adult reproductive system of Balb/C adult female.

    Material and Methods

    The above experiment was performed by preparing the aqueous extract of the plant and selecting three doses of 7.5g/kg,9g/kg and 15g/kg;Simultaneously with the experimental groups,the distilled water sham group was injected and the control group was kept intact.Vaginal stromal smear cycles were prepared to examine different stages.One hour after the last injection,the mice were given blood samples and then killed by chloroform and their uterus and ovaries were prepared for histological studies.

    Results

    Statistical studies have shown that injecting 7.5g/kg of extract reduces estrogen and restores 33% of fertility in mice. Also, at a dose of 9 g/kg, the mice were initially infertile, but one month after the last injection, 16.5% of the mice showed a return to fertility and a significant increase in progesterone.

    Conclusion

    According to the results, it is probably because physalines have a pseudo-steroidal structure. The receptor is occupied by physaline and can cause abnormalities in the growth and development of oocytes, uterine tissue cells and ovaries, and infertility.

    Keywords: Physalin, Physalis alkekengi, Uterus, Ovary, Infertility
  • E Shaygannia, MH Nasr-Esfahani *, F Sotoodehnejadnematalahi, K Parivar Pages 127-138
    Aim

    The current study aims to utilize varicocele induction in male rat models to evaluate effect and impact of varicocele on DNA integrity.

    Material and Methods

    66 male Wistar rats were divided into 3 groups: control, sham and varicocele-induced (VI). 2 months post-VI, Sperm parameters, percentage of sperm DNA damage, persistent histone and lipid peroxidation were assessed.

    Results

    Animal weight and their epididymal length shown no significant changes but there were significant differences in testis volume and sperm parameters between VI group versus control and sham groups. Similarly, increased level of DNA damage, persistent histone and lipid peroxidation were evaluated, and compared between varicocele and control group.

    Conclusion

    Based on literature and the result of this study, it is likely that increase oxidative stress following varicocele induction leads to lipide peroxidation, DNA damages and reduced sperm parameters. In the current study, by taking the advantage of homogenous genetic background and high number of animals, we showed that varicocele have damaging effect on DNA and chromatin integrity and should be reversed in human before aiming for pregnancy.

    Keywords: DNA Damages, lipid peroxidations, Oxidative stresses, Varicocele
  • AR Farmani, M Mohammad Salehi, F Mahdavinezhad, M Kouhestani, S Mohammadi, J Ai * Pages 139-153

    The electrical functions of the organs of the body, such as the nervous system and the bone marrow, has led to the use of one of the most widely used therapies called electrotherapy, especially in relieving pain. On the other hand, advancement of medical science in the field of stem cells and regenerative medicine has made many perspective in treatment. Electric field-based therapies have recently been widely used in the treatment of cancer. The main issues in regenerative medicine are the proliferation of stem cells to the required extent and their guidance towards differentiation into the target tissue. Electric field stimulation (EF) can also play an important role in generating appropriate stem cell responses and guiding stem cell differentiation through osteogenesis/neurogenesis/cardiomyogenesis. Nanosecond pulsed electric field as well as the tumor treating field have attracted a lot of attention today for the treatment of cancer. Major signaling pathways and cellular responses elicited by electrical stimulation are included reactive oxygen species and heat shock proteins, intracellular calcium ion fluctuation, so ATP production, clustering or re-accumulation of cell surface receptors, Skeletal regeneration and so on that they can affect the stem cell fate. Also, none invasive, ease of usage, and reasonable price have caused that the treatment of cancer with an electric field to be increasingly used. This study seeks to provide a brief overview of the effects of electrical signals on the behavior of stem cells, as well as examples of their therapeutic effects in the treatment of tissue lesions and cancer.

    Keywords: Stem cells, electrical stimulation, regenerative medicine, therapeutic effects, cancer treatment
  • F Azadi, M Khodaei Motlagh *, A Mohammadi Sangcheshmeh, E Seyedjafari Pages 154-166
    Aim

    In current study was aimed to investigate effects of different concentrations Genestein on osteogenic differentiation and proliferation of adipose driven mesenchymal stem cells (ADMSCs) from Turkman horses.

    Material and Methods

    In this experimental study, ADMSCs were treated with 10-8,10-7,10-6,10-5 μM concentrations of Genestein with osteogenic medium. The proliferation and cell viability of Genestein was evaluated by MTT test for 7 days after cell culture, and the role of It on osteogenic differentiation was investigated by alizarin red staining, alkaline phosphatase assay and calcium content for 21 days. The data were analyzed with One-way ANOVA.

    Results

    The results of MTT test showed after treatment of cells by Genestein, it had no toxic effect (p < 0.05). The activity of alkaline phosphatase in 10-5 concentration treated cells was higher than the other which attributed to the end of differentiation process (21th day) (p < 0.05). The results of alizarin red staining and calcium content showed that the maximum level of Genestein has significantly increase of precipitation of mineral ions on extracellular matrix on 14th and 21st days compare other concertation.

    Conclusion

    According to the results of this study, Genestein promoted differentiation of these cells in to osteoblast cells without any toxicity effect.

    Keywords: Mesncymal stemcell, Turkaman horse, Osteogenic differentiation, Genestein