بهینه سازی و خالص سازی هورمون اکسین (اندول-3-استیک اسید) در باکتری ریزوبیوم

اندول-3- استیک اسید(IAA) فراوان ترین و مهمترین اکسین طبیعی شناخته شده که علاوه بر گیاهان، بسیاری از ریزموجوداتها نیز قادرند این هورمون را تولید کنند که در این تحقیق تولید آن در باکتری ریزوبیوم مورد بررسی قرار گرفته است. تمامی سویه های مورد مطالعه که شامل 12 سویه مختلف ریزوبیوم بود از مناطق مختلف اطراف اصفهان از گرهک سالم ریشه 4 نوع گیاه مختلف شامل نخود(sativum Pisum)، عدس(Lens culinaris)، لوبیا(Phaseolus luntus) و یونجه(Medicago sativa) جداسازی گردید و تولید IAA در آنها بررسی شد و در مرحله بعدی با کمک روش آماری تاگوچی و استفاده از نرم افزار Qualitek-4 (W32b) مراحل بهینه سازی انجام شد. در آخرین مرحله، خالص سازی IAA در این باکتری توسط روش کروماتوگرافی لایه نازک انجام گرفت. نتایج نشان داد از بین کل سویه ها، 9 سویه تولیدکننده هورمون IAA بوده و بهترین سویه آن (سویه 1) که از نخود جداسازی شده بود (R. leguminosarum biovar ciceri) دارای بالاترین راندمان تولید به میزان ppm 439 بود. میزان تولید هورمون IAA در این سویه های بومی، چندین برابر سویه های بررسی شده در مقالات مشابه دیگر بود که نشان می داد این سویه های بومی توانایی بالایی در تولید این هورمون مهم را دارند. زمان گرمخانه گذاری به مدت 72 ساعت، تحت دمای 30 درجه سانتی گراد، استفاده از مانیتول به عنوان منبع کربن و نیترات پتاسیم به عنوان منبع نیتروژن در حضور 3 میلی گرم در میلی لیتر تریپتوفان، بهترین شرایط ممکن برای تولید ماکزیمم هورمون اندول-3- استیک اسید در شرایط آزمایشگاهی شناخته شد. در نهایت IAA خالص با روش کروماتوگرافی لایه نازک به دست آمد.