Fusion of Cholera toxin B subunit (ctxB) with Shigella dysenteriae type I toxin B subunit (stxB), Cloning and Expression that in E. coli
Message:
Abstract:
Background And Objective
Shiga toxin (STx) is the main virulence factor in Shigella Dysenteriae type I and is composed of an enzymatic subunit STxA monomer and a receptor-binding STxB homopentamer. Shigella toxin B subunit (STxB) is a non-toxic homopentameric protein responsible for toxin binding and internalization into target cells by interacting with glycolipid (Gb3). Cholera toxin B subunit (CTB) has been known as a mucosal adjuvant for vaccines and genetic fusions of CTB with several hetroantigens such as stxB and can increase humoral and mucosal immunity response.
Materials And Methods
In this study، after primer designing، the ctxB and stxB genes were amplified by PCR and cloned into the pGEM-T vector. The stxB gene with a nonfurin linker was fused to the ctB gene in the pGEM vector via the restriction enzyme method and thereafter the fused genes of ctB-stxB were subcloned in the pET28a (+) as an expression vector. The expressed chimeric protein was induced with IPTG and evaluated via the SDS. PAGE and Western blot techniques.
Result
The pET28a (+) /ctxB-stxB expression vector was confirmed by endonuclease digestion، PCR، and sequence analysis. The CTB-STB fusion protein was confirmed by the SDS-PAGE and Western-blot.
Conclusion
The CTB-STB recombinant protein can be used as a new and desirable mucosal vaccine for Shigella Dysenteriae type I.
Language:
Persian
Published:
Journal of Fasa University of Medical Sciences, Volume:2 Issue: 3, 2012
Pages:
135 - 141
magiran.com/p1074309  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
در سایت عضو شوید و هزینه اشتراک یک‌ساله سایت به مبلغ 400,000ريال را پرداخت کنید. همزمان با برقراری دوره اشتراک بسته دانلود 100 مطلب نیز برای شما فعال خواهد شد!
پرداخت با کارتهای اعتباری بین المللی از طریق PayPal امکانپذیر است.
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی همه کاربران به متن مطالب خریداری نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.