مقایسه روش هایPCR-RFLP، مستقیم میکروسکوپی و کشتNNN در تشخیص لیشمانیوز جلدی

لیشمانیوز، بیماری عفونی انگلی با انتشار وسیع در مناطق معتدله و گرمسیری است. با توجه به اینکه ارتقاء روش های تشخیص صحیح و سریع CL (Cutaneous Leishmaniasis) نقش به سزایی در کاهش عوارض بیماری به خصوص پیشگیری از بروز اسکارهای وسیع دارد، هدف از این مطالعه ارزیابی روش PCR-RFLP با پرایمرهای ITSRL و L5.8Sدر مقایسه با روش های مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN برای تشخیص CL می باشد.

در این مطالعه از بین افراد دارای ضایعه ی جلدی مشکوک به CL،60 بیمار با Leishmanin Skin Test (LST) مثبت انتخاب و از هر کدام سه نمونه جهت بررسی میکروسکوپی، کشت در محیط NNN وPCR–RFLP تهیه گردید. لام های رنگ آمیزی شده با لنز روغنی×100 جهت مشاهده اشکال اماستیگوت انگل آزمایش شد. جهت کشت مقداری از مواد برداشت شده از حاشیه ضایعه بیمار به محیط NNN، انتقال داده شد. پس از استخراجDNA با استفاده از روش PCR-RFLP تکثیر از توالی ITS1با پرایمرهای اختصاصی صورت گرفت و بعد از هضم باآنزیم HaeIII ایزوله ها درمقایسه با سویه های استاندارد تعیین گونه شد. داده ها با استفاده از آمار توصیفی و تست حساسیت با استفاده از نرم افزار SPSS15 مورد تجزیه وتحلیل قرار گرفت.

روش میکروسکوپی در 36 مورد از 60 بیمار (%60) و نتایج کشت نمونه ها در محیط NNN در 37 مورد (%62) مثبت شد. در روش PCR-RFLP 55 مورد (%91)، با این روش مثبت و تعیین گونه شد.

با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه و امکان تشخیص گونه ها با روش PCR-RFLP، فراهم نمودن امکانات استفاده از این تکنیک، همراه با روش مستقیم میکروسکوپی و کشت NNN در موارد لازم، در مراکز درمانی پیشنهاد می گردد.