جداسازی و شناسایی مایکوباکتریوم های سریع الرشد از آب و خاک در رباط کریم با استفاده از روش PCR- RFLP

مایکوباکتریوم های غیرتوبرکلوزیس خصوصا مایکوباکتریوم های سریع الرشد پاتوژن های محیطی فرصت طلبی هستند که نقش آنها در بیماری های انسان به طور فزاینده شناخته شده است و انسان ها می توانند از منابع مختلف محیطی خصوصا آب و خاک دچار عفونت شوند. باتوجه به انتشار جهانی مایکوباکتریوم های سریع الرشد، تشخیص و شناسایی آنها هم از نظر کلینیکی و هم از نظر مطالعات اپیدمیولوژیک بسیار حائز اهمیت است. در این مطالعه فراوانی مایکوباکتریوم های سریع الرشد از منابع آب و خاک در مناطق مختلف شهر رباط کریم با استفاده از روش PCR-RFLP با مورد هدف قرار دادن ژن های hsp65و 16S-23S Rrna مورد بررسی قرارگرفت.
در مطالعه حاضر 454 نمونه آب و خاک از مناطق مختلف شهر رباط کریم جمع آوری گردید. بعد از استخراج DNA، قطعه hsp65 با استفاده از روش PCR-RFLPتکثیر و سپس محصولات PCR با دو آنزیم محدودکننده BsteII و HaeIII هضم گردید و قطعه 16S-23SRNA نیز تکثیر و محصولات PCR با دو آنزیم محدودکنندهHaeIII، CfoI هضم گردید و آنالیز بر اساس الکتروفورز بر روی ژل پلی آکریل آمید انجام شد.
بر اساس کشت و مشاهده میکروسکوپی، 49 نمونه (5/21%) از 227 نمونه خاک و 144 نمونه (63%) از 227 نمونه آب از نظر مایکوباکتریوم مثبت گردید و با استفاده از روش PCR-RFLP، 7 نمونه خاک و 29 نمونه آب دارای مایکوباکتریوم سریع الرشد بودند و نتایج حاصل از روش مولکولار با نتایج حاصل از کشت مطابقت کامل داشته و مایکوباکتریوم فورتیتوم با فراوانی 8/27 %، مایکوباکتریوم سریع الرشد عمده در مجموع نمونه های آب و خاک بود.
مایکوباکتریوم فورتیتوم عمده ترین مایکوباکتریوم سریع الرشد جدا شده در مجموع نمونه های آب و خاک در منطقه رباط کریم می باشد.