طراحی، ساخت، همسانه سازی و بیان ژن بتا دیفنسین و تاثیر آن در ترمیم زخم

در میان پپتید های ضد میکروب، دیفنسین ها یکی از بزرگ ترین خانواده ی پپتید های ضد میکروب می باشند و به واسطه ی فعالیت آن ها بر ضد باکتری ها، قارچ ها و ویروس ها، به عنوان آنتی بیوتیک های نسل جدید منفعت بسیار دارند. هدف از این مطالعه طراحی، سنتز، همسانه سازی و بیان پروتئین بتا دیفنسین نوتروفیل های گاو (BNBD2) به منظور بررسی خاصیت ترمیم زخم بوده است.
در این مطالعه ژن (BNBD2) با توجه به کدون های ترجیحی باکتری E.coli بهینه سازی و سنتز شد. از ناقل (+)pET-32a به منظور زیر همسانه سازی ژن BNBD2 استفاده گردید. بیان پروتئین BNBD2 با ماده ی القا کننده (IPTG) با استفاده از سیستم الکتروفورز عمودی (SDS-PAGE) بررسی گردید. خاصیت ترمیم زخم توسط ایجاد زخم بر روی یک گروه از موش ها و تیمار آن ها با پروتئین بتا دیفنسین، در مقایسه با گروه کنترل مورد مطالعه قرار گرفت.
نتایج نشان داد که ژن BNBD2 به طور موفقیت آمیزی در ناقل (+)pET32a همسانه سازی شده است. پروتئین نوترکیب توسط IPTG القا گردید. کاهش معنی دار سطح زخم در گروه تیمار در مقایسه با گروه کنترل وجود داشت.
پروتئین نوترکیب BNBD2 با موفقییت در سیستم پروکاریوتی بیان شد. این پروتئین می تواند در آینده در ترمیم زخم مورد استفاده قرار گیرد.