تشخیص سریع استرپتو کوک های بتاهمولتیک گروه A با روش ایمونوفلورسنت مستقیم

استرپتوککهای بتا همولتیک گروه A مهمترین عامل گلو درد باکتریای هستند. تب رماتیسمی حاد و گلومرولونفریت از عواقب ابتلا به عفونت استرپتوککی گروه A می باشند. تشخیص سریع این عفونتها در درمان و پیشگیری از ابتلا به عفونت اهمیت زیاد دارد. با روش های سنتی باکتریولوژیک حداقل 48 ساعت طول می کشد تا این باکتری تشخیص داده شود. هدف از اجرای این پروژه کاهش زمان تشخیص استرپتوککهای بتاهمولتیک گروه A به 8 -10 ساعت و با استفاده از میکروسکوپ فلورسنت بوده است. بدین منظور استرپتوککهای بتا همولتیک گروه A (سوش استانداردATCC 1447) در 300 میلی لیتر محیط مایع Todd - Hewitt کشت داده شده در انکورباتور شیکردار به مدت 18 ساعت در دمای °c37 قرار داده شد. آنگاه باکتری ها سانتریفیوژ شده و پس از تیمار، به خرگوش تزریق شدند. پس از اینکه تیتر آنتی بادی ضد استرپتوکک در سرم خرگوش به سطح مطلوب رسید سرم خرگوش جدا شده، ایمونوگلبولین های آن تخلیص شده و با FITC گونژوگه گردیدند. رقت های مختلف از سرم ایمن گونژوگه خرگوش تهیه شد و گسترشی از باکتری های مختلف (استافیلوکک آرئوس، استرپتوکک پیوژن و استرپتوککهای بتا همولتیک گروه B،C و استرپتوککهای غیر همولتیک(را با این رقتها رنگ آمیزی نموده با میکروسکوپ فلورسنت مورد مشاهده قرار داده شد. نتایج نشان داد که گونژوگه تهیه شده، استرپتوککهای بتا همولتیک گروه A را به خوبی میتواند شناسایی کند. نمونه ها براساس شدت رنگ فلورسنت از 4+ (درخشان ترین) تا 1+ (کم رنگ ترین) درجه بندی شدند. از میان سوشهای باکتریایی مورد آزمایش استافیلوکوک آرئوس با درخشندگی معادل 2 در مقایسه استرپتوککهای بتا همولتیک گروه A که 4+ بود مشاهده گردید. حساسیت و ویژگی گونژوگه تهیه شده به ترتیب1/96% و 4/94% محاسبه گردید. نتیجه اینکه با استفاده از گونژوگه تهیه شده می توان با اطمینان قابل قبولی استرپتو کک های بتاهمولتیک گروه A رادر کمتر از 10 ساعت تشخیص داد.