بیان آنتی ژن نوترکیب گیرنده فاکتور رشد اپیدرمال انسانی (HER-2) به عنوان یک نشانگر سرطان سینه در سیستم مخمری و بررسی خصوصیات آن

بیش از دو دهه است که استفاده از داروهای ایمونوتراپی در درمان سرطان رواج پیدا کرده است. در این روش آنتی بادی منوکلونال علیه آنتی ژن سرطانی استفاده می شود که با قرار گرفتن روی آنتی ژن مانع عمل کرد آن می گردد. نشان داده شده است که بیان بیش از حد فاکتور رشد اپیدرمال انسانی (HER-2) به عنوان یک فاکتور پیش آگهی دهنده و پیش بینی کننده مهم در سرطان سینه، با افزایش خطر عود و مرگ ناشی از سرطان سینه همراه است. هدف این پروژه بیان آنتی ژن HER-2 با کیفیت و عمل کرد بالا در سیستم بیانی یوکاریوتی مخمر و استفاده از آن در مطالعات بعدی می باشد.
بیان بخشی از توالی گیرنده خارج سلولی HER-2 در وکتور pPICZα در میزبان پیکیاپاستوریس سویه X33 در محیط BMGY انجام شد. بیان پروتئین توسط SDS-PAGE و صحت پروتئین بیان شده با تکنیک الایزا بررسی گردید.
بررسی بیان پروتئین Her-2 بر روی ژل SDS-PAGE 7% به همراه مارکر پروتئینی 186 کیلودالتون نشان داد که بیان پروتئین مورد نظر پس از القا با IPTG افزایش یافته است. جهت ارزیابی واکنش آنتی ژن Her-2 بیان شده با آنتی بادی منوکلونال هرسپتین از تست الایزا استفاده شد و نتایج نشان داد که آنتی ژن به دست آمده میل ترکیبی بالایی نسبت به آنتی بادی هرسپتین دارد.
در این مطالعه آنتی ژن Her-2 در سیستم بیانی مخمر تولید شد. با توجه به مزایای سیستم بیانی مخمر از جمله بیان ترشحی پروتئین، تا خوردگی مناسب پروتئین، گلیکوزیلاسیون و فعالیت پروتئین حاصل شده در بازه گسترده pH، آنتی ژن Her-2 بیان شده در مخمر از کیفیت و عملکرد مطلوبی برخوردار بوده و در مطالعات آتی مورد استفاده قرار خواهد گرفت