تمایز سلول های بنیادی اندومتر رحم به سلول های عصبی با استفاده از مولکول کوچک LY294002

سلول های بنیادی اندومتریال، برای اولین بار در سال 2004 شناسایی شدند. این سلول ها قادر به خودتجدیدی گسترده و دارای پتانسیل تمایز به غضروف، استخوان، چربی، نورون و الیگودندروسیت می باشند. مسیر سیگنالینگ PI3K/Akt در عمل کردهای متعدد سلولی از جمله تمایز، بقاء و مرگ سلولی نقش دارد و مهار آن می تواند منجر به تمایز سلولی شود. هدف از این مطالعه بررسی تمایز سلول های بنیادی اندومتریال به سلول های عصبی با استفاده از مهار مسیر PI3K/Akt توسط ریز مولکول Ly294002 می باشد.
بافت اندومتریال رحم بیماران به طور آنزیمی تیمار شد و سلول های تفکیک شده در محیط کشت 12DMEM/F حاوی 10% FBS کشت داده شدند. بعد از پاساژ سوم سلول ها برای اثبات بنیادی بودن با مارکرهای CD105، CD90، CD146، CD31 و CD34 مورد آنالیز با فلوسایتومتری قرار گرفتند. سپس قدرت تمایز عصبی سلول ها در شرایط تمایزی، به مدت 21 روز مورد بررسی قرار گرفت. به منظور بررسی میزان بیان مارکرهای اختصاصی سلول های بنیادی عصبی از روش های ایمونوسیتوشیمی وتکنیک Real-time PCR استفاده گردید.
نتایج فلوسایتومتری نشان داد که سلول ها نسبت به CD105، CD90، CD146 مثبت و نسبت به CD31 و CD34 منفی می باشند. بررسی های ایمنوسیتوشیمی نشان دهنده بیان مارکرهای عصبی NF و Chat در سلول های تیمار شده با ریز مولکول Ly294002 بود. بررسی های حاصل از Real-time PCR نیز نشان دهنده بیان مارکرهای NF و Chat در سطح mRNA بود.
این مطالعه نشان داد که سلول های بنیادی آندومتر رحم توانایی تمایز به سلول عصبی را در شرایط تمایزی مناسب دارا می باشند و استفاده از ریز مولکول Ly294002 می تواند با مهار مسیر PI3K/Akt باعث مهار تکثیر سلولی و القا تمایز سلولی شود