Preparation of polyclonal antibody against recombinant coat protein of Cucumber mosaic virus isolate B13
Abstract:
Cucumber mosaic virus (CMV) is one of widely-spread viruses of plants with the broadest host range encompassing over 1200 species. One major limiting factor for detection of the virus is unavailability of the virus-specific antibodies especially in developing countries. Recombinant DNA technology facilitates antibody preparation without requiring special equipment. In this study, coat protein (CP) gene cDNA of CMV was subcloned from pTZ57CMVCP into pET21a expression vector and transformed into Escherichia coli strain Rosetta. Expression of CMV CP was examined by sodium dodecyl sulphate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and its identity was confirmed by western blotting, dot blot immunobinding assay (DIBA) and enzyme- linked immunosorbent assay (ELISA) using anti- CMV antibody. The expressed protein was purified using T7•Tag affinity purification kit and used as antigen for raising polyclonal antibodies in two mice. The purified anti-CMV CP IgG and the conjugated IgG performed favourably in terms of specificity and sensitivity to detect both expressed CP (antigen) and CMV isolates in infected cucurbit plants using plate trapped antigen (PTA)- ELISA, double-antibody sandwich (DAS)-ELISA and western blotting. The prepared antibodies can be applied in serological and sero-molecular tests in studies on the virus and in screening of plants for the infection. This is the first report of preparation of antibodies against CP of an indigenous isolate of CMV.
Language:
English
Published:
Journal Of Crop Protection, Volume:6 Issue: 1, 2017
Pages:
25 - 34
magiran.com/p1676210  
برخی از خدمات از جمله دانلود متن مقالات تنها به مشترکان مگیران ارایه می‌گردد. شما می‌توانید به یکی از روش‌های زیر مشترک شوید:
اشتراک شخصی
در سایت عضو شوید و هزینه اشتراک یک‌ساله سایت به مبلغ 400,000ريال را پرداخت کنید. همزمان با برقراری دوره اشتراک بسته دانلود 100 مطلب نیز برای شما فعال خواهد شد!
پرداخت با کارتهای اعتباری بین المللی از طریق PayPal امکانپذیر است.
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی همه کاربران به متن مطالب خریداری نمایند!
توجه!
  • دسترسی به متن مقالات این پایگاه در قالب ارایه خدمات کتابخانه دیجیتال و با دریافت حق عضویت صورت می‌گیرد و مگیران بهایی برای هر مقاله تعیین نکرده و وجهی بابت آن دریافت نمی‌کند.
  • حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران می‌شود.
  • پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانه‌های چاپی و دیجیتال را به کاربر نمی‌دهد.