تقویت اثر داروی شیمی درمانی 5-فلورویوراسیل توسط توکسین منفذساز فراگاسئاتوکسین C در رده سلولی سرطان پستان MCF-7

شیمی درمانی به دلیل عوارض جانبی دوز بالای استفاده در درمان بسیاری از بیماری ها با محدودیت های زیادی مواجه است. در این تحقیق با استفاده از توکسین منفذساز فراگاسئاتوکسین C (FraC) که به صورت نوترکیب در باکتری تولید شده است، تسهیل ورود داروی شیمی درمانی 5-فلورویوراسیل بر رده سلولی سرطان پستان MCF-7 مورد بررسی قرار گرفته است.

در این مطالعه تجربی، پس از تهیه ژن توکسین FraC از منبع تجاری، ژن با استفاده از آنزیم های محدود کننده NcoI و XhoI، وارد وکتور بیانی pET28a شد. بیان توکسین در باکتری اشریشیا کلی به وسیله IPTG القا شد و توکسین به وسیله روش کروماتوگرافی میل ترکیبی Ni-NTA تخلیص شد. پس از بررسی فعالیت همولیز توکسین به وسیله روش توربیدومتری، اثرات سیتوتوکسیک و تقویت اثر داروی 5-فلورویوراسیل به وسیله سنجش تریپان بلو و تست MTT مورد ارزیابی قرار گرفت. تحلیل داده ها به وسیله تست T-student و نرم افزار SPSS Inc Vession v16 در سطح معنی داری پنج درصد انجام شد.

توکسین FraC در باکتری اشریشیا کلی به صورت نوترکیب تولید شده و به صورت خالص با خلوص نسبی حدود 86 درصد تهیه شد. اثرات سیتوتوکسیک این توکسین بر روی رده سلولی MCF-7 وابسته به دوز و زمان تیمار است. مقدار IC50 برای توکسین برابر 3/3 میکروگرم بر میلی لیتر محاسبه شد. در دوزهای غیرکشنده، این توکسین باعث تقویت اثر 4 تا 6 برابری داروی شیمی درمانی 5-فلورویوراسیل در زمان های مختلف (24 تا 72 ساعت) می شود.

 تقویت اثر داروی شیمی درمانی 5-فلورویوراسیل با تسهیل ورود این دارو به سلول های سرطان پستان MCF-7 توسط توکسین منفذساز FraC می تواند از عوارض شیمی درمانی این دارو بکاهد.