مطالعه و بررسی اثرات مهار ژن هایackA ، pta و poxB به وسیله ی RNA ی آنتی سنس روی ترشح استات و بیان اینترفرون بتای نوترکیب در باکتری اشریشیا کلای

اشریشیا کلای یکی از رایج ترین سیستم باکتریایی برای تولید پروتئین های نوترکیب دارویی محسوب می شود. تولید بیش از حد اسید استیک (استات) به عنوان یک محصول ناخواسته ی جانبی، مانعی بر سر راه استفاده از ای. کلای به شمار می رود. در این پژوهش، برای حل مشکل ترشح اضافی استات، از یک روش مهندسی متابولیک مبتنی بر فناوری آنتی سنس استفاده شد.

 یک پلاسمید نوترکیب حاوی توالی کد کننده اینترفرون نوترکیب بتای انسانی و سه قطعه آنتی سنس بر علیه ژن های استات کیناز، فسفوترانس استیلاز و پیروات اکسیداز طراحی شد. اثرات ایجاد شده توسط آن بر فیزیولوژی سلولی و بیان اینترفرون بتا و غلظت استات در باکتری ای. کلای بررسی شد.

 غلظت mRNA ژن های هدف گیری شده در سویه ی حاوی قطعات آنتی سنس در مقایسه با سویه ی کنترل کم تر شده بود. با استفاده از فناوری آنتی سنس، غلظت استات در محیط کشت کاهش یافته بود. بیان قطعات RNA آنتی سنس تاثیر نامطلوبی بر روند رشد سلولی ایجاد نکرد. به علاوه، بیشینه ی مقدار اینترفرون بتای نوترکیب در سویه ی کنترل شده با فناوری آنتی سنس در مقایسه با سویه ی کنترل بیش تر شده بود.

استفاده از فناوری آنتی سنس به منظور مهندسی متابولیک چرخه ی استات در ای. کلای موفقیت آمیز بود. فناوری توصیف شده در این پژوهش، قابلیت به کار گرفته شدن برای تولید سایر پروتئین نوترکیب دارویی، را دارا می باشد.