استفاده از آزمون لکه گذاری نقطه ای با پیکره بورخولدریا مالئی برای تشخیص بیماری مشمشه در ایران

مشمشه یکی از مهم ترین بیماری های قابل انتقال از حیوانات تک سمی بوده که عامل آن بورخولدریا مالیی است. با توجه به کانون بیماری در ایران و احتمال آلودگی انسان و خطرات ناشی از انتقال این باکتری، شناسایی سریع آن در حیوانات از اهمیت زیادی برخوردار می باشد. لذا هدف از این مطالعه طراحی یک روش تشخیص سریع شامل لکه نمایی نقطه ای برای تعیین حضور حضور آنتی بادی بود. برای این منظور 40 نمونه سرم اسب از  استان های مختلف اخذ و به همراه نمونه آنتی ژن پیکره باکتری بورخولدریا مالیی (کنترل مثبت) و سرم اسب های سالم (کنترل منفی) مورد آزمون قرار گرفتند. غلظت بهینه آنتی ژن-آنتی بادی با استفاده از چکر بورد برای سرم های مثبت و منفی مشخص گردید. پس از طراحی آزمون لکه گذاری نقطه ای، آنتی ژن روی چاهک کاغذ نیتروسلولز قرار داده شد و تثبیت آنتی ژن  با محلول بلاکینگ و سپس افزودن سرم اسب مشکوک به همراه کنترل مثبت و منفی انجام شد. در ادامه به آن آنتی بادی کونژوگه اضافه و نهایتا با افزودن سوبسترا به چاهک ها نتیجه ی واکنش به صورت ایجاد رنگ قرایت گردید. در این بررسی از 40 نمونه، شش مورد مثبت شناسایی گردید. با در نظر گرفتن مالییناسیون به عنوان آزمون استاندارد و مقایسه آن با لکه گذاری نقطه ای به ترتیب حساسیت و ویژگی 100٪ و 9/91٪  شد. نتایج نشان داد روش لکه گذاری نقطه ای به دلیل حساسیت بالا، سرعت، سهولت قرایت و قابلیت کاربردی صحرایی آن، در صورت تایید مراجع مسیول تشخیص در عفونت با بورخولدریا مالیی می تواند استفاده شود.